PCR-BHEL技術(shù)的建立及對(duì)血清中丙型肝炎病毒的檢測(cè).pdf

1、目的：聚合酶鏈反應(yīng)偶聯(lián)印跡雜交和酶聯(lián)放大技術(shù)(PCR-BHEL)的建立并應(yīng)用該技術(shù)檢測(cè)血液傳染性病毒。 方法：綜合聚合酶鏈反應(yīng)的高敏感性及印跡雜交和酶聯(lián)免疫技術(shù)的高特異性建立起PCR-BHEL技術(shù)，然后應(yīng)用該技術(shù)對(duì)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)的174例血清標(biāo)本(其中129例抗-HCV陽(yáng)性，45例抗-HCV陰性)的HCV RNA進(jìn)行檢測(cè)，并將該技術(shù)與逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)及熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)HC

2、V RNA的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，以確定該技術(shù)在檢測(cè)血液傳染性病毒中的優(yōu)越性(高特異性、高敏感性)。 結(jié)果：129例抗-HCV陽(yáng)性標(biāo)本經(jīng)PCR-BHEL和RT-PCR檢測(cè)HCV RNA的檢出率分別為78.29％(101/129)和62.02％(80/129)；45例抗-HCV陰性標(biāo)本經(jīng)PCR-BHEL和RT-PCR檢測(cè)HCV RNA的檢出率分別為6.67％(3/45)和2.22％(1/45)，兩種檢測(cè)方法的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.01

3、＜P＜0.05)，即PCR-BHEL對(duì)HCV RNA的檢出率高于RT-PCR。91例抗-HCV陽(yáng)性標(biāo)本經(jīng)PCR-BHEL和FQ-PCR檢測(cè)HCV RNA的檢出率分別為75.82％(69/91)和62.64％(57/91)；18例抗-HCV陰性標(biāo)本經(jīng)PCR-BHEL和FQ-PCR均未檢出HCVRNA，兩種檢測(cè)方法的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 結(jié)論：PCR-BHEL較RT-PCR的靈敏度高，能夠有效地提高HCV RNA的檢出