PCR-BHEL技術的建立及對血清中丙型肝炎病毒的檢測.pdf

1、目的：聚合酶鏈反應偶聯(lián)印跡雜交和酶聯(lián)放大技術(PCR-BHEL)的建立并應用該技術檢測血液傳染性病毒。 方法：綜合聚合酶鏈反應的高敏感性及印跡雜交和酶聯(lián)免疫技術的高特異性建立起PCR-BHEL技術，然后應用該技術對酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測的174例血清標本(其中129例抗-HCV陽性，45例抗-HCV陰性)的HCV RNA進行檢測，并將該技術與逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)及熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)HC

2、V RNA的檢測結(jié)果進行比較，以確定該技術在檢測血液傳染性病毒中的優(yōu)越性(高特異性、高敏感性)。 結(jié)果：129例抗-HCV陽性標本經(jīng)PCR-BHEL和RT-PCR檢測HCV RNA的檢出率分別為78.29％(101/129)和62.02％(80/129)；45例抗-HCV陰性標本經(jīng)PCR-BHEL和RT-PCR檢測HCV RNA的檢出率分別為6.67％(3/45)和2.22％(1/45)，兩種檢測方法的差異有統(tǒng)計學意義(0.01

3、＜P＜0.05)，即PCR-BHEL對HCV RNA的檢出率高于RT-PCR。91例抗-HCV陽性標本經(jīng)PCR-BHEL和FQ-PCR檢測HCV RNA的檢出率分別為75.82％(69/91)和62.64％(57/91)；18例抗-HCV陰性標本經(jīng)PCR-BHEL和FQ-PCR均未檢出HCVRNA，兩種檢測方法的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 結(jié)論：PCR-BHEL較RT-PCR的靈敏度高，能夠有效地提高HCV RNA的檢出