槲皮素對肝星狀細胞活化、增殖、凋亡及PPAR-γ表達的影響.pdf

1、目的:觀察槲皮素(Quercetin)對大鼠肝星狀細胞 HSC-T6增殖、凋亡和PPAR-γmRNA的表達的影響,以探討槲皮素抗肝纖維化的作用機制。
　　方法:實驗分為5組:第一組為空白對照,即肝星狀細胞非處理組;第二組至第五組在活化的肝星狀細胞中分別加入不同劑量槲皮素,使槲皮素終濃度分別為10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L。每組加藥后繼續(xù)孵育24小時。用MTT法觀察槲皮素對肝星狀細胞增殖的影響

2、;AOEB染色觀察每組細胞凋亡情況;高效液相色譜法(HPLC)檢測細胞內(nèi)甘油三酯的含量;RT-PCR法檢測每組肝細胞α-SMA、PPAR-γmRNA水平的表達,從而確定槲皮素對肝星狀細胞影響的量效關系。將40μmol/L的槲皮素與活化肝星狀細胞共同處理12、24、48小時,再分別檢測各組細胞α-SMA、PPAR-γmRNA水平的表達;MTT,AOEB染色,檢測各組細胞的增殖,凋亡情況;高效液相色譜法檢測細胞甘油三酯含量,作出時效關系。實

3、驗數(shù)據(jù)以x±s表示,計數(shù)資料用百分比(％)表示,兩組間比較采用χ2檢驗,用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,以P﹤0.05作為差異顯著性標準。
　　結(jié)果:經(jīng)不同濃度的槲皮素(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)處理肝星狀細胞24小時,結(jié)果顯示:Quercetin對自活化肝星狀細胞增殖有明顯抑制作用,AOEB染色表明,凋亡細胞增多。槲皮素呈濃度依賴性的增加自活化肝星狀細胞內(nèi) TG,同時呈

4、濃度依賴性的減少α-SMAmRNA的表達、增加PPAR-γmRNAA的表達。將40μmol/L的槲皮素與自活化肝星狀細胞共同處理12、24、48小時,結(jié)果顯示:細胞內(nèi)甘油三酯含量呈時間依賴性增加;槲皮素呈時間依賴性的減少肝星狀細胞的增殖,增加凋亡,同時呈時間依賴性的減少α-SMA的表達、增加PPAR-γmRNA的表達。
　　結(jié)論:1、槲皮素能減少肝星狀細胞的活化、增殖,增加凋亡。
　　2、槲皮素能增加細胞內(nèi)甘油三酯含量、可能