“化學成分—湯液相態(tài)—毒效作用”聯(lián)合分析附子配伍甘草增效解毒作用.pdf

1、目的：
　　本論文以附子-甘草藥對為研究對象，考察其配伍前后湯液成分、相態(tài)理化性質(zhì)、湯液毒效作用的變化，進而分析三者之間相關性，試圖建立“湯液相態(tài)-化學成分-藥理作用”整體機制分析模式，從“細微—宏觀—效果”三個層面分析附子配伍甘草“增效解毒”作用，闡明中藥配伍過程中湯液整體物質(zhì)狀態(tài)與作用機制，為研究中藥湯液提供一條新的研究思路。
　　方法與結果：
　　第一部分：測定附子配伍甘草前后湯液中9種指標成分含量的變化，結果顯

2、示附子配伍甘草合煎后，湯液中6種烏頭類生物堿和甘草中甘草酸與甘草次酸含量均降低，而甘草中甘草苷含量提高；建立同時測定附子配伍前后4種湯液化學成分的HPLC分析方法；建立附甘配伍前后4種湯液的指紋圖譜共有模式；采用模型識別技術對4種湯液中化學成分進行分析，結果表明，附甘合煎液與附甘合并液成分有顯著差異，體現(xiàn)于成分量與成分質(zhì)的差異；通過偏最小二乘分析（PLS-DA）與聚類分析（HCA）篩選出12個對差異貢獻較大的特征峰。
　　第二部分

3、：依據(jù)相律理論，借助界面化學手段，測定表征配伍前后4種湯液相態(tài)的理化參數(shù)，即電導率、鹽度、黏度、濁度、表面張力、粒度。試驗結果顯示，附子甘草配伍共煎后，湯液的理化性質(zhì)有明顯改變。附甘合煎液湯液的電導率、鹽度低于其他三種湯液（附子單煎液、甘草單煎液、附甘合并液），而合煎液中粒子粒徑明顯大于其他三種湯液。
　　第三部分：采用全自動分析儀、試劑盒比對法測定灌服不同湯液后，大鼠體內(nèi)與肝、腎、心功能相關的生化指標（BUN、CREA、CK、A

4、LP、ALT、AST、LDH、SOD、MDA）的變化，結果顯示附子單煎液的毒性涉及大鼠腎、肝、心功能，其中對腎、肝臟有明顯毒性；對心臟的影響較為復雜，附子損害大鼠心肌細胞，但具有改善心臟功能作用；甘草對腎、肝、心有一定程度保護作用，能緩解附子對腎、心的損害，且附子合煎液的毒性小于附子單煎液。
　　采用BL-240生物機能系統(tǒng)，以心率、QRS延長率、心率失常潛伏期為指標，測定通過十二指腸注射不同湯液的大鼠的二導聯(lián)心電圖，結果顯示附子

5、單煎液、附甘合并液對大鼠心臟均有毒性。
　　第四部分：考察顯著影響配伍湯液化學成分差異的12個特征峰，通過灰色關聯(lián)度分析法，分析化學組分與配伍前后湯液藥效，化學組分與湯液相態(tài)的相關關系。關聯(lián)度排序結果顯示，12個特征峰中8個色譜峰與湯液相態(tài)、湯液毒效作用具有密切關系，通過對照品對照法鑒別出其中5個色譜峰為甘草苷、甘草酸、新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿，另外3種成分，經(jīng)HPLC分析提示可能為甘草中所含萜類成分與附子中所含生物堿類成分。<