PPARγP38、PA-1在肝細胞癌中的表達及臨床意義.pdf

1、目的:肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是惡性程度很高的惡性腫瘤,是臨床工作中常見惡性腫瘤中發(fā)病率較高的一種。全球范圍內,發(fā)病率在所有新發(fā)腫瘤中位居第六位,每年因腫瘤死亡病例數(shù)中位居第三位。而且絕大多數(shù)新發(fā)病例及死亡病例位于中國大陸、東南亞及撒哈拉沙漠以南非洲地區(qū),肝細胞癌已成為這些地區(qū)的主要公共健康問題。目前在中國大陸肝細胞癌在所有因腫瘤死亡病例中位居第二位,死亡率為:26.26/100000(男:3

2、7.55/100000,女:14.45/100000)。估計每年新發(fā)肝細胞癌病例數(shù)及死亡病例數(shù)分別為:360000例及350000例。因此深入研究肝癌的發(fā)生和發(fā)展的機制,探討有效的防治途徑是目前國內外肝癌研究的熱點。
　　 過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator-activatedreceptors,PPARs)是核激素受體超家族中的重要成員,是一類配體依賴的核轉錄因子,與脂肪的存儲、分化及代

3、謝等生理過程有密切關系。目前研究確認的PPARs有三種亞型(即PPAR-α、PPAR-γ及PPAR-δ),其中PPAR-γ是目前研究最廣泛的一種。近年來國內外研究發(fā)現(xiàn)在多種惡性腫瘤組織中均有PPAR-γ的表達上調,與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉化關系密切。絲裂原活化蛋白激酶(Pitogen-activated protein kinase,MAPKs)信號通路在許多惡性腫瘤的生長、分化、凋亡中扮演了重要作用。生物進化的高度保守性是MAPKs

4、信號傳導通路的主要特征,細胞信號通過MAPKS信號通路中的三級激酶級聯(lián)(MAPKKK-MAPKK-MAPK)形式傳導,通過激活下游轉錄因子,將細胞外部多種刺激信號傳遞至細胞核內的信號通路,其與細胞的增殖、分化、轉化、炎癥以及凋亡等多種生物學事件以及機體的多種生理病理過程相關。MAPKs是調控細胞生長與凋亡過程的重要信號傳導途徑,它包括P38MAPK通路、JNK/SAPK通路、ERK5/BMK1通路和ERK通路等主要亞型。P38MAPK信

5、號通路受細胞外信號的刺激而激活,磷酸化下游轉錄因子及作用于細胞周期,參與細胞的增殖、分化和凋亡。國外研究證實PPARs的活化與MAPKs信號通路具有密切關系。
　　 轉錄因子激活蛋白-1(activating protein-1,AP-1)是有兩部分轉錄因子組成的蛋白家族,通過亮氨酸拉鏈相結合并與DNA綁定,JUN(c-Jun,JunBand JunD)和Fos(c-Fos,FosB,Fral and Fra2)是AP-1主要組

6、成部分,在哺乳動物主要為c-fos和c-jun。研究表明:AP-1是重要的調節(jié)蛋白,在細胞的生長、分化、轉化和凋亡過程中起重要作用,是調節(jié)細胞增殖和生存的中樞。AP-1因子在惡性腫瘤過程中扮演著重要角色,通常增加AP-1的表達水平能夠增強靶基因的轉錄活性,調節(jié)AP-1的活性能在不同的水平影響細胞的命運和發(fā)生,包括:二聚物組成、轉錄和轉錄后事件及輔助蛋白相互作用。最近發(fā)現(xiàn)AP-1在微環(huán)境缺氧的條件下能夠促使腫瘤血管的生成而引起腫瘤的生長。

7、
　　 本實驗采用免疫組織化學方法聯(lián)合檢測肝細胞癌組織及正常肝組織中PPAR-γ、P38和AP-1(c-fos及c-jun)蛋白的表達,分析其與肝細胞癌臨床病理特征的關系及相互關系,并結合隨訪資料初步探討它們在肝細胞癌中表達的意義及其預后價值。
　　 方法:采用河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院肝膽外科2005-2008年手術切除并經病理證實的、隨訪資料完整的原發(fā)性肝癌標本57例,標本經病理組織學證實均為肝細胞癌。所有患者術前均未經過

8、任何抗腫瘤治療。20例正常肝組織標本取自肝血管瘤手術組織。標本切除離體立即固定于10％中性甲醛溶液,石蠟包埋。由兩位有經驗病理醫(yī)師進行病理組織學診斷。免疫組織化學方法檢測57例肝細胞癌組織及20例正常肝組織中PPAR-γ/、P38及AP-1(c-fos及c-jun)蛋白的表達,分析其與肝癌臨床病理特征的關系及相互關系,并結合隨訪資料探討它們在肝細胞癌中表達的意義及預后價值。本研究隨訪時間1.0～71.13個月,中位隨訪時間為26.1個月

9、。
　　 結果:
　　 1 PPAR-γ蛋白在肝細胞癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系在肝細胞癌組織中,PPAR-γ蛋白的表達率為45.6％,顯著高于正常肝組織中的表達(P＜0.05)。PPAR-γ蛋白在腫瘤直徑＞5cm組(56.7％)、門靜脈癌栓組(85.7％)的陽性表達率顯著增高(P＜0.05);PPAR-γ蛋白的陽性表達率與TNM分期有關,分期越晚陽性率越高(P＜0.05)。PPAR-γ蛋白表達與預后無關(x2=

10、0.009,P=0.757)。
　　 2 P38蛋白在肝細胞癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系
　　 用免疫組織化學法檢測肝細胞癌組織顯示,P38蛋白的陽性高表達率為64.9％,表達水平有明顯升高(P＜0.05)。P38蛋白在腫瘤直徑＞5cm組、單發(fā)腫瘤組和腫瘤直徑≤5cm組、多發(fā)腫瘤組中陽性表達情況分別為:63.3％、66.0％和66.7％、60.0％,統(tǒng)計學分析顯示均無顯著差異(P＞0.05);P38在伴有門靜脈癌

11、栓(87.5％)與無門靜脈癌栓(62.0％)的肝細胞癌組織中表達率無顯著差異(P=0.419);P38蛋白的陽性表達率與TNM分期無關(P=1.00)。P38蛋白表達與患者預后無關(x2=1.566,P=0.211)。
　　 3.AP-1(c-fos及c-jun)蛋白在肝細胞癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系
　　 免疫組織化學檢測肝細胞癌組織發(fā)現(xiàn),c-fos蛋白的表達率為71.9％,顯著高于正常肝組織中的表達(P＜0

12、.01);c-iun蛋白的表達率為77.2％,顯著高于正常肝組織中的表達(P＜0.01);c-fos蛋白在腫瘤直徑＞5cm組、門靜脈癌栓組中的高表達率分別為:66.7％、85.7％,在腫瘤直徑≤5cm組、無門靜脈癌栓組中的高表達率分別為:77.8％、70.0％,統(tǒng)計學分析無顯著差異(P＞0.05),且與腫瘤的個數(shù)、有無轉移及TNM分期無關(P＞0.05);c-iun蛋白在腫瘤直徑>5cm組、門靜脈癌栓組中的高表達率分別為:77.8％、8

13、5.7％,在腫瘤直徑≤5cm組、無門靜脈癌栓組中的高表達率分別為:76.7％％、76.0％,統(tǒng)計學分析無顯著差異(P＞0.05),且與腫瘤的個數(shù)、有無轉移及TNM分期無關(P＞0.05);c-fos及c-jun與肝細胞癌的生存期無關(x2=0.125,P=0.724及x2=0.284,P=0.594)。
　　 4 PPARγ和P38、AP-1(c-fos及c-jun)蛋白在肝細胞癌組織中的表達相關性分析
　　 統(tǒng)計學相關

14、分析顯示:在肝細胞癌組織中,PPAR-γ蛋白與P38蛋白表達正相關(r=0.378,P=0.004);P38蛋白與c-fos蛋白表達正相關(r=0.359.P=0.006);P38蛋白與c-jun蛋白表達正相關(r=0.301,P=0.023);c-fos蛋白與c-jun蛋白的表達呈顯著正相關(r=0.498,P=0.000)。
　　 結論:
　　 1 PPAR-γ、P38、c-fos及c-jun蛋白在肝細胞癌組織中的表

15、達水平明顯高于正常肝組織。
　　 2 PPAR-γ蛋白的表達水平與肝細胞癌的腫瘤直徑、門靜脈癌栓、TNM分期等生物學行為密切相關。P38、AP-1(c-fos及c-jun)蛋白表達水平與肝癌的腫瘤直徑、門靜脈癌栓、TNM分期等生物學行為無相關性。PPAR-γ、P38、AP-1(c-fos及c-jun)在肝細胞癌中的蛋白表達水平與生存期無相關性。
　　 3 PPAR-γ蛋白與P38蛋白表達有正相關性;P38蛋白與c-fos