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1、本研究的目的是: 1、驗(yàn)證化學(xué)刺激大鼠上矢狀竇區(qū)硬腦膜模擬偏頭痛發(fā)作的動(dòng)物模型的可行性。 2、研究NF-κB蛋白在偏頭痛痛覺信息傳遞中的作用。 方法: 1、雄性SD大鼠(體重為220-250)40只,隨機(jī)分為空白組(n=10),對(duì)照組(n=10),capsaicin1μM組(n=10),capsaicin10μM(n=10),共4個(gè)區(qū)組??瞻捉M為過深麻醉后直接處死;其他三組大鼠以臺(tái)式牙鉆顱骨鉆洞暴露SSS
2、后,分別給予蒸餾水(內(nèi)含6%的75%酒精)一滴、capsaicin1μM一滴、capsaicin10μM一滴,一滴量約0.1ml。刺激1小時(shí)后灌注固定,取腦干,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色技術(shù),行中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)冰凍切片c-fos蛋白(Fos)染色。 2、雄性SD大鼠(體重為220-250)70只,隨機(jī)為空白組(n=10),假手術(shù)組(n=10),刺激組(n=10),sumatriptan組(n=10),生理鹽水A組(n=10),氟桂利
3、嗪組(n=10),生理鹽水B組(n=10),共7個(gè)區(qū)組。氟桂利嗪組和生理鹽水B組大鼠于術(shù)前10天每日分別給予氟桂利嗪(1mg/mL,1mg/Kg)和生理鹽水(1ml/Kg)腹腔注射。空白組為過深麻醉后直接處死;其他6組大鼠以臺(tái)式牙鉆顱骨鉆洞暴露SSS后,將電極固定于其上硬腦膜,假手術(shù)組不給于電刺激,其余各組均以單刺激為脈寬250us、電流1.5mA、頻率3Hz的方波電流刺激2小時(shí)。Sumatriptan組和生理鹽水A組于刺激30分鐘時(shí)給
4、予5-HT1D受體激動(dòng)劑sumatriptan(1mg/mL,1mg/Kg)和生理鹽水(1m1/Kg)腹腔注射。各組均于刺激結(jié)束后1小時(shí)灌注固定,取腦干,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色技術(shù),行中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)冰凍切片NF-κB蛋白染色。 結(jié)果: 1、Capsaicin10μM組和capsaicin1μM組與空白組和對(duì)照組比較FOS陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多;capsaicin10μM組FOS陽性細(xì)胞數(shù)較capsaicin1μM組亦明顯增
5、多;對(duì)照組與空白組FOS陽性細(xì)胞數(shù)比較無顯著差異。 2、刺激組NF-κB陽性細(xì)胞數(shù)較空白組、假手術(shù)組、sumatriptan組和氟桂利嗪組明顯增多;sumatriptan組NF-κB陽性細(xì)胞數(shù)與生理鹽水A組比較顯著減少;氟桂利嗪組陽性細(xì)胞數(shù)與生理鹽水B組比較亦顯著減少;刺激組NF-κB陽性細(xì)胞數(shù)與生理鹽水A組和生理鹽水B組比較無顯著差異;空白組和假手術(shù)組之間NF-κB陽性細(xì)胞數(shù)亦無顯著差異。 結(jié)論: 1、辣椒辣素
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