課題1 漢族人ABCA1基因R219K多態(tài)性對(duì)血脂的影響及其與冠心病和2型糖尿病的關(guān)系;課題2 流感病毒的快速診斷.pdf

1、背景和目的高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平降低是早發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化(AS)發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。HDL-C動(dòng)員膽固醇從外周組織細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟進(jìn)行代謝，在膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)中發(fā)揮了重要作用。ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A1(ABCA1)控制細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出至apoAⅠ(HDL的主要載脂蛋白)，在RCT過(guò)程中起第一步限速作用。ABCA1基因突變可引起丹吉爾病(TD)，一種罕見(jiàn)的常染色體隱性遺傳性疾病，特征表現(xiàn)為HDL-C血漿水平降低，膽固醇在組織

2、細(xì)胞聚積，伴發(fā)廣泛的動(dòng)脈粥樣硬化。在一般人群中，ABCA1基因的一些常見(jiàn)單核苷酸多態(tài)性(SNP)亦會(huì)影響AS發(fā)生、冠心病嚴(yán)重程度和血脂水平，如HDL-C下降，甘油三酯(TG)升高。其中ABCA1基因R219K是7號(hào)外顯子第1051位核苷酸G變成A，使ABCA1蛋白質(zhì)第219位的精氨酸(R)變成賴(lài)氨酸(K)。但是有關(guān)ABCA1基因R219K多態(tài)性與冠心病發(fā)生危險(xiǎn)的關(guān)系國(guó)外不同的研究有許多矛盾之處，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道相對(duì)較少。 本研究旨在

3、探討我國(guó)北方地區(qū)漢族人ABCA1基因R219K多態(tài)性對(duì)血脂、脂蛋白和載脂蛋白水平的影響，及其與冠心病、糖尿病和糖尿病合并冠心病的關(guān)系，為動(dòng)脈粥樣硬化性心血管病的防治提供科學(xué)依據(jù)。 研究對(duì)象與方法研究對(duì)象均為我國(guó)北方地區(qū)漢族人群，包括109例健康人對(duì)照組、108例2型糖尿病患者(DM組)、141例冠心病患者(CHD組)和105例糖尿病合并冠心病的患者(DM+CHD組)。 采用改良碘化鈉法提取基因組DNA，聚合酶鏈反應(yīng)限制性

4、片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)法分析ABCA1基因R219K多態(tài)性?？偰懝檀?TC)、甘油三酯(TG)采用酶法測(cè)定。高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)采用直接勻相法測(cè)定。載脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)、載脂蛋白AⅡ(apoAⅡ)、載脂蛋白B(apoB)、載脂蛋白CⅡ(apoCⅡ)、載脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)、載脂蛋白E(apoE)、脂蛋白(a)[Lp(a)]采用免疫透射比濁法測(cè)定。 結(jié)果1.糖尿病

5、組、冠心病組及糖尿病合并冠心病組血清TG和LDL-C水平明顯高于對(duì)照組，CHD組和DM+CHD組血清HDL-C和apoAⅠ水平明顯低于對(duì)照組。 2.我國(guó)北方地區(qū)漢族人群ABCA1基因R219K多態(tài)性等位基因頻率R、K分別為0.528和0.472。K等位基因頻率與我國(guó)南方漢族人群和日本人近似，但低于美國(guó)黑人，高于歐洲高加索人和美國(guó)白人。 3.對(duì)照組、DM組、CHD組和DM+CHD組的ABCA1基因R219K多態(tài)性的基因型頻

6、率與性別、吸煙史和體重指數(shù)等無(wú)明顯相關(guān)。 4.ABCA1基因R219K多態(tài)性與血清HDL-C水平密切相關(guān)，K等位基因攜帶者HDL-C水平明顯高于RR基因型。在男性人群中，ABCA1基因變異攜帶者對(duì)血脂產(chǎn)生的影響更為明顯。 5.正常對(duì)照組ABCA1基因R219K多態(tài)性RR、RK、KK基因型頻率、R等位基因頻率、K等位基因頻率分別為28.5％、48.6％、22.9％、52.8％、47.2％；糖尿病組分別為29.6％、63.9

7、％、6.5％、61.5％、38.5％；冠心病組分別為44.7％、44.7％、10.6％、67.0％、33.0％；糖尿病合并冠心病組分別為30.5％、61.9％、7.6％、61.4％、38.6％。疾病組ABCA1基因R219K多態(tài)性基因型分布與對(duì)照組有顯著差異，四組的K等位基因頻率分布均無(wú)差異。 7.K等位基因與冠心病的患病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，OR值為0.61，95％CI為0.39～0.97，該等位基因可能是冠心病的保護(hù)因素。 6.

8、Logistic回歸分析顯示，年齡、吸煙、高血壓、低HDL-C和低apoAⅠ等是我國(guó)北方地區(qū)漢族人冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 結(jié)論本研究成功運(yùn)用了本實(shí)驗(yàn)室建立的改良碘化鈉法快速提取基因組DNA，PCR-RFLP法分析ABCA1基因R219K多態(tài)性的實(shí)驗(yàn)方法。該方法簡(jiǎn)便快捷，易于操作，非常適合大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查和臨床實(shí)驗(yàn)室采用。 ABCA1基因R219K多態(tài)性極大的影響了血清HDL-C水平，K等位基因攜帶者HDL-C水平明