外周血T淋巴細胞亞群及C反應(yīng)蛋白在腎癌綜合治療前后變化的臨床研究.pdf

1、腎細胞癌(renal cell carcinoma，Rcc)是泌尿外科最常見的惡性腫瘤，近年來其發(fā)病率有逐漸增高的趨勢，隨影像學(xué)檢查技術(shù)的進步，早期非轉(zhuǎn)移性腎癌比例增高。根治手術(shù)仍是首選治療方案，但術(shù)后有復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的可能，大約40-70％的患者術(shù)后會出現(xiàn)腫瘤遠處擴散。長期的臨床實踐發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)的放療、化療和激素治療對于腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的治療和預(yù)防效果不佳。RCC具有免疫源性。目前研究發(fā)現(xiàn)生物治療效果較好，并可提高生存率。機體抗腫瘤效應(yīng)主要是細胞

2、介導(dǎo)的細胞免疫，因而細胞免疫的狀態(tài)直接反映機體抗腫瘤免疫機能。常作為腫瘤患者術(shù)后預(yù)后的重要指標.CD4+細胞為T輔助細胞亞群，其既可產(chǎn)生IL-2、INF等細胞因子介導(dǎo)效應(yīng)細胞的細胞毒反應(yīng)和吞噬功能，又可輔助B細胞產(chǎn)生抗體而參與體液免疫，CD8+細胞系T殺傷細胞/抑制細胞亞群，是機體抗腫瘤的主要效應(yīng)細胞。因此監(jiān)測外周血T細胞亞群的變化可作為反映機體腫瘤免疫能力的一個指標。在化療-免疫治療中，早期外周血CD4+/CD8+淋巴細胞比值升高是一

3、項獨立的強預(yù)后因子。另外，C反應(yīng)蛋白C-reactive Protein(CRP)在腫瘤浸潤時血漿中水平將迅速顯著地升高，且隨疾病的轉(zhuǎn)歸而呈不同程度下降，其作用與上調(diào)巨噬細胞、TNF-a及MCP-1水平有關(guān)，故結(jié)合臨床可用于RCC的輔助診斷、病情活動性評估和治療判斷，是RCC的一項獨立預(yù)后因子。 CD4+CD25+FOXP3+調(diào)節(jié)性T細胞(Treg) 是具有特定表型和抑制功能的T細胞淋巴亞群，可通過多種方式抑制抗腫瘤免疫從啟動到

4、療效的整個階段，在腫瘤逃逸中起者重要作用。腫瘤患者體內(nèi)調(diào)節(jié)性T細胞增多，不僅是一個普遍現(xiàn)象，而且對預(yù)后及療效評價等方面具有指導(dǎo)意義，是免疫治療的新的有效靶點。此類研究對于臨床腎癌術(shù)后的生物治療有現(xiàn)實的指導(dǎo)意義。本課題通過了解干擾素a(INF-a)、白細胞介素2(IL-2)和5氟尿嘧啶(5-FU)聯(lián)合應(yīng)用于腎癌根治性切除術(shù)后患者，觀察治療前后淋巴細胞亞群包括其中調(diào)節(jié)性T細胞的變化及血漿中CRP水平的改變，進而了解生物治療對于腎癌治療的療效

5、。由于病例采集分布在多家醫(yī)院，故屬于多中心自體前后對照前瞻性研究。主要研究方法及結(jié)果如下： 1對象選取 選取白求恩國際和平醫(yī)院泌尿外科、河北醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院泌尿外科兩個臨床試驗中心，自2007年1月1日起從住院行腎腫瘤切除術(shù)的患者中選取術(shù)前經(jīng)超聲、CT、MRI檢查，明確診斷單側(cè)腎占位性病變，標本例數(shù)30例。其中男性17例，女性13例，年齡18-78歲，平均60.3歲。術(shù)后病理報告均為腎透明細胞癌。AJCC分期為：Ⅰ期

6、(T1aN0M0)2例，Ⅱ期(T2N0M0)15例，Ⅲ(T3N0M0)期10例，Ⅳ期((T4N2 M0)1例，(T4N2 M1))2例)3例。瘤體直徑1.8～16cm，平均6.7cm。 2綜合治療方法 2.1根治性腎切除術(shù)：切除范圍包括腎周筋膜、腎周脂肪、腎、腎周淋巴結(jié)，同側(cè)腎上腺、上1/2輸尿管； 2.2保留腎單位的腫瘤剜除術(shù)：阻斷腎蒂后切除距離病變部位1.0cm范圍的腎組織，再將殘存腎單位縫合止血后，去除阻斷

7、?？刂谱钄鄷r間＜15min： 2.3免疫化療：術(shù)后1周切口愈合后開始按以下方案開始行免疫治療該方案周期8周，間隔3個月可重復(fù)進行。每個治療周期中。IFN-α總劑量72MIU，IL-2總劑量126MIU，5-FU總劑量4.0g。 2.3術(shù)后每月復(fù)查血常規(guī)、肝腎功能、肝和腎B超、胸部及骨X線。治療期間根據(jù)患者病情行相應(yīng)對癥治療。 3觀察指標及統(tǒng)計學(xué)分析分別設(shè)患者手術(shù)前一周內(nèi)，術(shù)后一周及應(yīng)用免疫治療一療程(8周)后為3個觀察點

8、。 3.1分別取患者在3個觀察點的外周靜脈全血3ml經(jīng)散射比濁法測定CRP值作為自體前后對照變量； 3.2分別取患者在3個觀察點的外周靜脈EDTA-Na2抗凝全血1ml經(jīng)流式細胞儀行T淋巴細胞及其亞群免疫標記，記錄患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T細胞值等數(shù)據(jù)作為自體前后對照變量； 3.3分別取患者在3個觀察點的外周靜脈EDTA抗凝全血1ml經(jīng)流式細胞儀行CD4+CD25+T淋巴細胞(Tre

9、g細胞)數(shù)作為自體前后對照變量。統(tǒng)計學(xué)分析：變量分布的分析、配對資料的t檢驗，或Wilcoxon檢驗。 4結(jié)果：該研究顯示30例明確診斷的RCC患者經(jīng)過綜合治療共9w后外周血CRP水平較治療前有明顯降低；外周血T淋巴細胞亞群中CD3+水平在治療后明顯升高，CD3+CD4+T細胞變化不明顯，CD3+CD8+T細胞呈下降性變化，CD4+/CD8+值明顯升高；Treg細胞明顯降低。 本研究通過觀察RCC患者在綜合治療前后的外周