淋巴細胞亞群與臨床

1、淋巴細胞亞群免疫表型與臨床,,,主要內(nèi)容,概念各類淋巴細胞的基礎知識淋巴細胞亞群檢測的臨床意義,一、概念,淋巴細胞 屬白細胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生，是機體免疫應答功能的重要細胞成分。淋巴細胞的免疫表型 淋巴細胞的膜表面分子（分化群抗原 CD）可用于鑒定和區(qū)分其亞群和亞類，是研究淋巴細胞的重要工具。淋巴細胞亞群 按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T細胞、B細胞和自然殺傷(NK)細胞。淋巴細胞

2、的免疫表型 淋巴細胞的膜表面分子（分化群抗原 CD）可用于鑒定和區(qū)分其亞群和亞類，是研究淋巴細胞的重要工具。,淋巴亞群在外周血中的比例（%淋巴細胞）,T淋巴細胞 50-84%NK細胞 7-40%B淋巴細胞 5-18%,各類淋巴細胞的基礎知識,,T淋巴細胞,,,概念 來源于骨髓的淋巴樣干細胞，在胸腺中成熟的淋巴細胞，故稱胸腺依賴性淋巴細胞（thymus-dependentlymphocyte），

3、簡稱T細胞。功能 負責細胞免疫功能，參與抗腫瘤、抗細胞內(nèi)感染微生物、移植排斥、遲發(fā)型超敏反應；對部分體液免疫發(fā)揮輔助功能。免疫表型：CD3，與TCR形成復合體，是T細胞識別抗原和轉(zhuǎn)導信號的主要單位。 CD3+/CD4+：輔助性T細胞 CD3+/CD8+：殺傷性T細胞,T淋巴細胞的分化發(fā)育,T細胞在胸腺中的發(fā)育T細胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育,T細胞在胸腺中的發(fā)育,三個階段雙陰性階段 (DN)雙陽性

4、階段 (DP)單陽性階段 (SP)三個重要事件TCR基因重排陽性選擇陰性選擇三個重要結(jié)果獲得功能性TCR獲得MHC限制性獲得自身耐受,T細胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育,初始T細胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依賴區(qū)T細胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分化為具有不同效應功能的T細胞亞群，效應T細胞和記憶T細胞。,T淋巴細胞亞群,按T細胞所處的活化階段 初始T細胞（naive T cell）

5、 效應T細胞（effector T cell） 記憶性T細胞（memory T cell）按TCR的表型分類 TCR?? + T細胞 TCR?? + T細胞,按T細胞的CD4和CD8分子表型 CD4+ T細胞 輔助T細胞 CD8+ T細胞 殺傷T細胞 按T細胞的功能分類 Th（help T cell）

6、 Tc/C TL（cytotoxic T cell） Tr（regulatory T cell）,初始T細胞、效應T細胞和記憶T細胞,初始T細胞表型：CD45RA+、 CD62L+、CD25-（IL-2R）特點：未接觸抗原的成熟T細胞，有分化潛能效應T細胞表型： CD4+、CD8+遷往炎癥部位，執(zhí)行細胞免疫效應記憶性T細胞表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）特點：存活期長，再次接受抗原刺激

7、后可迅速活化,TCRαβT細胞和TCRγδT細胞,TCRγδT細胞數(shù)量少，占5％多為CD4―CD8―（DN細胞）；少數(shù)為CD8+分布于皮膚、粘膜參與固有免疫，是抗感染的第一線細胞TCRαβT細胞數(shù)量多，CD4+或CD8+（SP細胞）TCR識別譜廣，是參與免疫應答的主要細胞群,,Th、CTL、Ts和Treg細胞,輔助性T細胞（Th） 主要表面標記：CD4＋CD8- 主要種類：TH1，TH2 功能：具

8、有輔助其他免疫細胞分化和調(diào)節(jié)免疫應答（促進和抑制）的作用細胞毒性T細胞（CTL） 主要表面標記：CD4-CD8+CD28+ 功能：特異性直接殺傷靶細胞 殺傷機制： 釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細胞 通過Fasl介導靶細胞的凋亡,,抑制性T細胞（Ts） 主要表面標志：CD4-CD8+CD28- 功能：對免疫應答有重要的負調(diào)節(jié)功能，抑制性T細胞功能的異常，常與T自身免疫

9、性疾病、第I型超敏反應等疾病發(fā)生有關。調(diào)節(jié)性T細胞（Treg） 主要表面標記：CD4+CD25+ 功能：抑制免疫應答,小結(jié),NK淋巴細胞,,NK細胞：一種大顆粒淋巴細胞。英文全稱為“natural killer cell”，也稱作“自然殺傷細胞”。 它是一種能直接殺傷靶細胞效應的特殊的淋巴細胞系，具有抗腫瘤抗感染免疫調(diào)節(jié)的功能，且表現(xiàn)為速發(fā)效應。在醫(yī)學上被稱作是“人體抵抗癌細胞和病毒感染細胞的第一道防線”。,

10、NK細胞的表型,NK細胞表面標志物：CD3-/CD16+CD56+與T細胞、B細胞相比，NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈（P75，CD122），CD11b/CD18陽性。,細胞因子誘導殺傷細胞（CIK）,CIK（cytokine-induced Killer）細胞是由r-IFN、CD3-Ab、IL-1、IL-2等細胞因子在體外誘導并大量擴增的具有殺傷腫瘤

11、活性的細胞，是一種新型、高效、廣譜的免疫細胞，是目前最新的腫瘤免疫治療手段。CIK細胞：CD3+T細胞為主的異質(zhì)性細胞群體，同時表達CD3、CD56，兼CTL強大的抗瘤活性，和NK細胞非MHC限制性殺瘤特點，目前所知殺傷活性最強的免疫效應細胞。,,CIK的表型及起源：表型： CD3+CD56+和CD3－CD56－兩個亞群，主要效應細胞CD3+CD56+。分布：優(yōu)先分布肝臟，CD3+CD56+占肝臟CD3細胞的1/3，其次外周血

12、，占１-5%。來源：主要是CD3+CD56－的T細胞，多數(shù)是CD4-CD8 + 及CD4-CD8-。,B淋巴細胞,,B淋巴細胞是免疫系統(tǒng)中的抗體產(chǎn)生細胞。產(chǎn)生的抗體可與抗原起特異性的結(jié)合，如中和細菌的外毒素使其失去毒性作用；抗體與抗原結(jié)合后形成的復合物易被吞噬細胞清除；抗體與抗原結(jié)合后再結(jié)合補體清除病原體。B細胞特異性標志物：CD19、CD20等B淋巴細胞檢測時，多用CD3-CD19+來作為檢測標志。,B細胞的亞群,周圍

13、淋巴器官中的B細胞具有異質(zhì)性可依據(jù)CD5是否表達分為B1和B2兩亞群,淋 巴 細 胞 亞 群 與 臨 床,,淋巴細胞亞群的檢測內(nèi)容,,目前常做以下項目的檢測,淋巴細胞亞群分析T細胞亞群分析T淋巴細胞（CD3+）輔助T細胞(CD3+CD4+)殺傷/抑制T細胞（CD3+CD8+)CD4+/CD8+的比值B細胞(CD3+CD19+)NK細胞(CD3-CD16+56+)活化淋巴細胞的檢測,TBNK檢測的適用人群,腫瘤病人化療過

14、程中，抗癌藥物對同樣處于增殖狀態(tài)的、對腫瘤敏感的活化淋巴細胞也有殺傷作用，甚至免疫功能嚴重損毀?；顒悠诘淖陨砻庖卟』颊?，必然表現(xiàn)為淋巴細胞亞群絕對值和活化淋巴細胞百分比的明顯異常。懷疑有免疫缺陷的病人器官移植患者術后監(jiān)測中更具有不可或缺的作用……,淋巴細胞亞群的正常參考值（%淋巴細胞群）,,,,,,,NK細胞,,,CIK細胞,,B細胞,淋巴細胞亞群的臨床意義,,,淋巴細胞亞群分析是檢測細胞免疫和體液免疫功能的重要指標，它總體反映機

15、體當前的免疫功能、狀態(tài)和平衡水平，并可以輔助診斷某些疾?。ㄈ缱陨砻庖卟?、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態(tài)反應性疾病等），分析發(fā)病機制，觀察療效及檢測預后有重要意義 。當某種細胞亞群所占百分比過高或過低，都提示存在免疫功能紊亂，但一般情況下對疾病的診斷和鑒別無特異性。,淋巴細胞亞群測定的結(jié)果解釋,T細胞異常 CD4細胞異常 CD8細胞異常 CD4/CD8比值異常 B細胞異常 NK細胞異常,,總T、總B、NK細胞可以用來判斷某

16、些免疫缺陷和自身免疫性疾病，也可以用于監(jiān)測移植后得免疫重建。,T細胞減少,見于先天性免疫缺陷病（例如DiGeorge綜合癥，胸腺發(fā)不發(fā)育）以及腎臟和心臟移植后接受預防排斥的免疫調(diào)節(jié)藥物OKT-3的患者也常見于惡性腫瘤、自身免疫性疾?。⊿LE和RA等）、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接受放療、化療或者使用腎上腺皮質(zhì)激素等免疫抑制劑資料的患者。,T細胞增多,見于慢性活動性肝炎、重癥肌無力等自身免疫病活動期,,CD4淋巴細胞減少：見于惡性腫瘤

17、、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應用免疫抑制劑患者。CD4淋巴細胞增加：可能有過強的細胞免疫反應；或某些免疫增強藥物的有效結(jié)果。 CD8淋巴細胞增多：見于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等。CD8淋巴細胞減少：見于機體對各種病毒感染的免疫反應；腫瘤患者具有抗腫瘤免疫反應時 。CD8細胞與CD4細胞同時減少：見于各種嚴重的免疫缺陷以及腫瘤患者晚期或免疫系統(tǒng)嚴重損傷后。,CD4/CD8比值異常,CD4

18、/CD8＞2.5表明細胞免疫功能處于“過度活躍”狀態(tài)，容易出現(xiàn)自體免疫反應，見于類風濕性關節(jié)炎、I型糖尿病等。CD4／CD8＜1．0稱為“免疫抑制”狀態(tài)，常見于（1）免疫缺陷病，如艾滋病時的比值常顯著小于0.5；（2）惡性腫瘤，當發(fā)生癌轉(zhuǎn)移時,CD3 、CD4 細胞數(shù)明顯減少的同時CD8 細胞數(shù)明顯增多,CD4/ CD8 比值明顯降低,提示惡性腫瘤患者晚期細胞免疫功能更低,預后更差 ；（3）再生障礙性貧血、白血?。唬?）某些病毒感染；

19、CD4/CD8降到1.0以下為“倒置”,是較為明顯的異常；（5）用于器官移植后監(jiān)測機體的免疫狀態(tài)、用藥劑量的調(diào)整、抑制排斥反應的發(fā)生。若移植后CD4/CD8較移植前明顯增加，則可能發(fā)生排斥反應。比值持續(xù)減低表明移植后感染，若比值<0.2時應停用免疫抑制劑，以免繼發(fā)嚴重感染而導致移植失敗。注意分清主要是CD8細胞增多還是CD4減少,B細胞的異常,B細胞明顯增加：見于淋巴組織增生失調(diào)（例如慢性淋巴細胞白血病），也見于病毒感染早期。

20、 B細胞缺如：見于原發(fā)性B細胞缺陷病（如性聯(lián)無丙種球蛋白血癥）和重癥聯(lián)合免疫缺陷（T細胞同時缺如）；體液免疫功能不良者則減少；在生命垂危時可呈現(xiàn)極度減少,NK細胞異常,NK細胞增多：見于病毒感染，腫瘤早期患者（尚有抗腫瘤免疫反應時）NK細胞減少：免疫功能低下，免疫抑制藥物使用后，腫瘤晚期,活化淋巴細胞的檢測（CD69/HLA-DR/CD71） 活化淋巴細胞的標志有CD25 （IL-2R），CD69，CD71，CD38，CD95