淋巴細胞亞群檢測在兒科的應用免疫

1、淋巴細胞亞群檢測在兒科的應用,,朱 鐳聯(lián)系電話：0351-3361059、13593176688,為臨床提供更多信息，提高醫(yī)療安全防護措施。篩查免疫缺陷疾病及監(jiān)測藥物對免疫功能的影響。指導臨床合理用藥。,淋巴細胞亞群檢測在兒科的應用,《反復呼吸道感染的臨床概念和處理原則》： 免疫功能測定有助于發(fā)現(xiàn)原發(fā)、繼發(fā)免疫缺陷病。包括體液免疫、細胞免疫；補體、吞噬功能等檢查，也應注意有無頑固濕疹、血小板

2、減少、共濟失調(diào)、毛細血管擴張等異常。,在特異性免疫反應中，體液免疫和細胞免疫之間既各有其獨特的作用，又可以相互配合，共同發(fā)揮免疫效應。當細菌、病毒等病原體侵入人體后，首先誘發(fā)體液免疫，因為T細胞不能識別入侵的病毒等抗原，只有當病毒或胞內(nèi)寄生菌侵入宿主細胞，細胞表面出現(xiàn)了來自病毒等病原體的小分子蛋白質(zhì)抗原，并與細胞表面的受體結(jié)合成復合物時，T細胞才能識別，進而引發(fā)細胞免疫，使靶細胞裂解，暴露出隱藏其中的病原體，再通過體液免疫將其清除。假若

3、病原體不是胞內(nèi)寄生物，則只能誘發(fā)體液免疫。,體液免疫與細胞免疫的聯(lián)系：,從作用對象上看，體液免疫清除的是游離在寄主細胞外的抗原及其產(chǎn)生的有毒物質(zhì)；細胞免疫則摧毀侵入到寄主細胞內(nèi)的病毒、胞內(nèi)寄生菌或外來的組織團塊、癌變的細胞等。 從作用方式上看，體液免疫是通過效應B細胞（漿細胞）分泌抗體，并與抗原發(fā)生特異性結(jié)合來清除抗原；細胞免疫則是通過效應T細胞（殺傷T細胞）分泌穿孔素使靶細胞溶解死亡。,體液免疫和細胞免疫的區(qū)別：,《醫(yī)

4、學綜述》2000年第6卷第7期,①艾滋病:免疫功能普遍低下是艾滋病患者最明顯的特征。艾滋病患者外周血中CD4細胞顯著低于正常對照組，而CD8細胞在正常范圍內(nèi)，CD4 /CD8比值下降。 ②慢性乙型病毒性肝炎:慢性肝炎患者CD3、CD4下降，CD8亦稍有下降，CD4/CD8比值正常，說明慢性肝炎患者T細胞輔助性、殺傷性功能下降，引起病毒清除困難，導致慢性遷延性肝損傷；慢活肝、肝硬化組CD3下降，CD4亦明顯下降，CD8增高

5、, CD4 /CD8比值下降，造成患者免疫自穩(wěn)功能下降，從而引起自身免疫損傷，肝細胞持續(xù)性、大量損傷，形成慢活肝、肝硬化；乙肝患者CD8細胞增高，CD4 /CD8下降，導致過度活化的細胞毒性T細胞對肝細胞產(chǎn)生損害作用。因此，對T細胞亞群的檢測，有助于慢性肝炎類型的鑒別，有助于了解肝炎病毒復制的程度，了解藥物療效，更好地指導治療。 ③此外，在傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染、流行性出血熱、麻疹急性期、水痘、猩紅熱和一些

6、上呼吸道感染的患者均可表現(xiàn)為CD4細胞下降，CD8細胞升高以及CD4 /CD8比值下降。因此，CD4/CD8比值的倒置被認為是病毒感染性疾病的重要指征。,在細菌性疾病中的研究表明，結(jié)核性胸膜炎患者胸水中CD4/CD8比值明顯增高，而重癥結(jié)核病患者外周血中該比值下降。 不同類型麻瘋患者的T細胞亞群研究發(fā)現(xiàn)，瘤型麻瘋患者CD8細胞下降，CD4細胞上升，而結(jié)核樣型患者CD8細胞則在正常范圍。 寄生蟲?。篊one

7、y等研究了曼氏血吸蟲病患者外周血T細胞亞群，發(fā)現(xiàn)肝脾大的患者，其CD3和CD4細胞均較正常人顯著下降。另外，弓形體病、瘧疾、利什曼病等都表現(xiàn)為CD8細胞上升，CD4細胞及CD4 /CD8比值下降。 總之，測定外周血CD3、CD4和CD8細胞亞群的水平可以正確判斷機體的細胞免疫功能，為臨床提供用藥指導和判斷預后的可靠指標。,正常人外周血白細胞CD45-SSC及T亞群散點圖,,患兒男, 5個半月,以“發(fā)熱、腹瀉11天,皮疹7

8、天”為主訴入院。入院后診斷為: (1)腹瀉病; (2)發(fā)熱待查:結(jié)締組織病?(3)營養(yǎng)不良性貧血。入院后給予抗感染、補液,調(diào)整腸道微生態(tài),營養(yǎng)支持治療,腹瀉治愈,仍發(fā)熱,皮疹漸增多,蔓延至上腹部、胸前,皮疹呈棕色或棕黑色。入院第12天對患兒左大腿內(nèi)側(cè)一皮疹下結(jié)節(jié)進行活檢見:表皮角化,真皮脂肪壞死,炎性細胞浸潤,考慮脂膜炎。但療效不顯。體液免疫檢查正常; T細胞亞群: CD3+ 2.41%(56%~84% ), CD4+ 0.53%

9、 (27%~51% ), CD8+ 0.50% (15%~44% ), CD4+/CD8+ 1.06。追問病史:此患兒生后接種卡介苗部位常有滲液,不久結(jié)痂,結(jié)痂后不久又出現(xiàn)滲液,如此反復。遂對既往骨髓片及組織片進行抗酸染色,均見大量抗酸桿菌。確診為原發(fā)性T細胞免疫缺陷病合并卡介苗接種后播散性結(jié)核病、結(jié)核性結(jié)節(jié)性脂膜炎。后因經(jīng)濟困難家長要求出院隨訪結(jié)果出院2 d后死亡。,《原發(fā)性免疫缺陷病的早期識別和干預》: 200

10、1年11月,美國疾病控制和預防中心在喬治亞洲首府Atland召開了一個專題研討會。會議最終就PID(primary immunodeficiency,原發(fā)性免疫缺陷病)的相關問題達成了四點框架:①公共衛(wèi)生評估:運用傳統(tǒng)公共衛(wèi)生學方法評價PID對社會健康的影響;②以人群為基礎的干預:建立、貫徹和評價針對新生兒篩查實驗和早期識別原發(fā)性免疫缺陷病的方案,以便能早期診斷和治療PID患者;③篩查和診斷手段的評估:以保證PID患者對治療的順應

11、性和提高生活質(zhì)量;④交流:加強醫(yī)療保健者與公眾之間的交流,以促進及時、恰當?shù)貙ID進行診斷和干預。,目前以人群為基礎的新生兒篩查(newborn screening, NBS)主要應用于遺傳性疾病,但尚未開展有關PID的NBS。SCID是一種嚴重的聯(lián)合免疫缺陷,患兒在出生后處于無癥狀期的時間很短,如果不進行有效的免疫重建,往往在嬰兒期死亡。免疫重建的時間與預后的關系密切,如果在出生3個月內(nèi)進行造血干細胞移植存活率接近95%,如果在出

12、生3個月后進行移植則存活率降至76%。這是將SCID納入NBS的重要原因。SCID的免疫表型特點主要為嚴重的T淋巴細胞減少，流式細胞儀分析T細胞亞群(包括CD3+、CD4+和CD8+)、B細胞(CD19+) 和NK細胞(CD16+/CD56+)比例是主要的實驗室檢查,可對大多數(shù)患兒作出診斷。,,通過流式細胞儀對腎移植術(shù)后受者外周血T細胞亞群進行動態(tài)監(jiān)測，結(jié)果顯示腎移植術(shù)后發(fā)生排斥反應時，CD3 , CD4細胞及CD4 /CD8比值均升高

13、，經(jīng)激素沖擊治療有效的患者CD3, CD4細胞及CD4 /CD8比值逐漸下降，而CD3 , CD4細胞及CD4 /CD8比值居高不降者說明激素沖擊治療無效。,SARS患者T淋巴細胞亞群變化的初步研究(中西醫(yī)救治專題 陳文莉),SARS患者早期出現(xiàn)CD3+，CD4+，CD8+明顯降低，且CD4+/CD8+比值下降甚至倒置，提示SARS患者早期即存在免疫抑制現(xiàn)象，這一現(xiàn)象提醒我們早期使用免疫抑制作用的治療方法應當慎重，用藥時間不宜長，應

14、避免用超大劑量激素（如甲基強的松龍（MP）＞0.5g/d）沖擊療法。,胸腺肽α1對嚴重感染患兒的臨床療效及免疫功能的影響 中國臨床藥學雜志 CHINESEJObTINALOFCLINICALPHARMACY 2004年第13卷第3期,目的：探討兒童嚴重病毒感染和細菌感染中，胸腺肽a1對提高細胞免疫的功能，以及改善預后的作用。方法：臨床表現(xiàn)有多臟器受累的感染病例11例，在原先治療方案不變下，加用胸腺肽a1，觀察

15、用藥后患兒的臨床療效，并采用流式細胞儀檢測用藥前后T淋巴細胞亞群水平。結(jié)果：11例患兒經(jīng)治療后感染癥狀均有明顯的改善，T細胞亞群均有不同程度的改變，降低的CD4+T細胞明顯上升，增高的CD8+T細胞明顯降低，CD4／CD8比值趨于正常。觀察期間未見有明顯的藥物不良反應。結(jié)論：胸腺肽a1對T淋巴細胞亞群的異常具有雙向調(diào)節(jié)作用。,(1)低碘組(LI):攝碘量<1μg/d; (2)適碘組(NI):攝碘量為6·15μg/d;

16、 (3)5倍碘組(5HI):攝碘量為30·75μg/d; (4)10倍碘組(10HI):攝碘量為61·50μg/d; (5)50倍碘組(50HI):攝碘量為307·50μg/d; (6) 100倍碘(100HI):攝碘量為615·00μg/d。,碘缺乏和碘過量對甲狀腺自身免疫影響的實驗研究,對T細胞百分比進行評價時必須掌握3個公式:①正常情況下獲得的流式細胞儀檢測結(jié)果應滿足: (CD3+)% +

17、(CD19+)% +(CD16/56+)% =100%,常規(guī)檢查可有出入。一般認為±5%,如相差過于懸殊,臨床具有一定提示意義。資料顯示以感染和血液腫瘤最易出現(xiàn)等式嚴重偏離;②(CD3+CD4+)% +(CD3+CD8+)% =(CD3+)%,當檢測結(jié)果偏離此等式時提示存在雙陰性或雙陽性T細胞。臨床上這種情況發(fā)生較多,其中以雙陰性T細胞最為常見;③(CD3+CD4+)% >(CD3+CD8+)%,?？梢杂肅D4/CD

18、8的比值來體現(xiàn),但目前尚無這一比值的正常值范圍。一般而言CD4/ CD8比值應>1,也就是說CD3+CD4+T細胞數(shù)應>CD3+CD8+T細胞數(shù)。當發(fā)生比值倒置應注意判別是由于CD3+CD4+T細胞減少還是由于CD3+CD8+T細胞增多所致。,判斷各項指標的高低:,流式細胞儀獲得的結(jié)果是外周淋巴細胞群中各種細胞組分所占的比例,這種比例的變化是相互影響的。一個細胞組分的增高或降低必然造成其他組分降低或增高。因此當發(fā)生異常時必須

19、明確是哪一細胞組分所引起的變化。由于整個細胞群中主要有3種細胞:T、B和NK細胞。通常根據(jù)其中2種相同變化趨勢來判定淋巴細胞亞群百分比的變化是由另一種獨立變化趨勢的細胞亞群所引起。,臨床免疫學是一門較新的臨床專業(yè),目前在各國、各地區(qū)根據(jù)本地的實際情況,形成了不同類型的組合方式,如血液-免疫、風濕-免疫、腎臟-免疫、過敏-免疫等不同類型,其出發(fā)點是借助傳統(tǒng)專業(yè)的優(yōu)勢培育臨床免疫專業(yè)的發(fā)展，而兒童免疫功能評價更缺少系統(tǒng)的文獻資料。細胞免疫功