黑龍江省部分地區(qū)綿羊捻轉(zhuǎn)血矛線蟲和蛇形毛圓線蟲對苯丙咪唑類抗藥性的調(diào)查.pdf

1、毛圓科線蟲病是羊群易感染的寄生蟲病，常給農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)造成了嚴(yán)重的損失。研究黑龍江省綿羊感染毛圓科線蟲（Trichostrongylidae）的流行病學(xué)，發(fā)現(xiàn)田間感染的毛圓科線蟲對苯丙咪唑類(Benzimidazoles，BZs)藥物抗藥性，用分子生物學(xué)方法研究的文章相對較少。目前，國內(nèi)外已經(jīng)明確的苯丙咪唑抗藥性機(jī)制是β-微管蛋白(β-tubulin)同種型Ⅰ基因(isotyoe-Ⅰ)第200位上密碼子的突變引起的抗藥性。此突變已確定由TTC

2、變?yōu)門AC，導(dǎo)致了由苯丙氨酸(phenylalanine，Phe)變異為酪氨酸(tyrosine，Tyr)[1，2]，通過PCR-RFLP技術(shù)方法，調(diào)查黑龍江省部分地區(qū)綿羊場對苯丙咪唑類抗藥性的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲（Haemonchuscontortus，H.contortus和蛇形毛圓線蟲（Trichostrongylus colubriformis，T.colubriformis）β-微管蛋白同種Ⅰ型200突變位點(diǎn)的存在現(xiàn)狀。
　　檢

3、測結(jié)果，發(fā)現(xiàn)齊齊哈爾市依安縣的某羊場在2003年未發(fā)現(xiàn)第200位抗藥性突變點(diǎn)的存在;哈爾濱市太平區(qū)2004年未檢測到此抗藥性突變位點(diǎn);大慶市羊場2006年的抽查中也未發(fā)現(xiàn)此突變點(diǎn)的存在。在哈爾濱市阿城新華鎮(zhèn)的樣品中2013年和2015年發(fā)現(xiàn)β-微管蛋白第Ⅰ同種型基因200位點(diǎn)上密碼子的突變。黑龍江省三個城市的131條雄蟲樣品，均未檢測到抗藥性純合子rr。阿城新華鎮(zhèn)在2013年和2015年抗藥性雜合子rS分別為3％(1/30)、16％(2

4、/12)，其他樣品均是敏感性純合子;相應(yīng)的抗藥性等位基因頻率r分別為2％和9％。敏感性等位基因占絕大多數(shù)。檢測哈爾濱市阿城新華鎮(zhèn)和大慶市2012年-2016年的67條的蛇形毛圓線蟲β-微管蛋白200位點(diǎn)的突變，大慶市調(diào)查抽樣的成蟲與三期幼蟲未發(fā)現(xiàn)抗藥性位點(diǎn)存在。阿城新華鎮(zhèn)只在2013年和2015年檢測到抗藥性位點(diǎn)，基因型rr分別為0％(0/23)和7％(1/14)，rS分別為9％(2/23)和7％(1/14)，其余地區(qū)檢測樣品為敏感性純

5、合子。抗藥性等位基因頻率r依次為4％和11％，發(fā)現(xiàn)樣品敏感性等位基因頻率居多。
　　檢測的所有基因頻率與等位基因型頻率的結(jié)果趨于一致。在阿城新華鎮(zhèn)蛇形毛圓線蟲β-微管蛋白第200氨基酸抗性位點(diǎn)出現(xiàn)的頻率高于捻轉(zhuǎn)血矛線蟲，并且2015年抗性基因頻率偏高于2013年。檢測到自然界存在抗藥性純合子rr,試驗(yàn)結(jié)果證明β-微管蛋白第200位突變點(diǎn)在黑龍江省捻轉(zhuǎn)血矛線蟲和蛇形毛圓線蟲這兩個蟲株中存在。本論文對開展我國反芻獸寄生蟲對BZs抗藥性