人工合成E-選擇素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦組織一氧化氮合酶表達(dá)的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、第一部分：人工合成E-選擇素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響
　　目的：通過(guò)改良Zea Longa線栓法建立局灶性腦缺血再灌注損傷模型，應(yīng)用人工合成E-選擇素對(duì)SD(Sprague-Dawley)大鼠進(jìn)行干預(yù)，研究其對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后的腦梗死體積、腦組織含水量及顯微結(jié)構(gòu)的影響。
　　方法：36只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和人工合成E-選擇素治療組，每組12只。通過(guò)改良Zea Longa線栓法，即：采用頸部旁正

2、中切口，皮片保護(hù)迷走神經(jīng)，運(yùn)用多聚-L-賴(lài)氨酸包被頭端的栓線等，建立SD大鼠腦缺血再灌注損傷模型。通過(guò)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、TTC染色、干濕比重法、光鏡及電鏡觀察病理切片等方法，進(jìn)一步了解人工合成E-選擇素對(duì)腦缺血再灌注損傷的干預(yù)作用。
　　結(jié)果：Zea Longa線栓法模型部分改良后模型制作成功率為88%。缺血區(qū)的腦組織經(jīng) TTC染色后呈蒼白色，對(duì)照組無(wú)梗死灶，治療組大鼠腦梗死體積為234±17 mm3，較模型組286±21mm3減少

3、(P<0.05)。對(duì)照組腦組織含水量79.02±0.75%；模型組82.06±0.84%；治療組腦組織含水量80.30±0.65%。病理結(jié)果提示對(duì)照組腦缺血區(qū)神經(jīng)元無(wú)損傷表現(xiàn)，模型組缺血區(qū)腦組織神經(jīng)細(xì)胞有胞漿水腫、細(xì)胞器缺乏、核質(zhì)深染固縮等不同程度缺血性改變，治療組較模型組神經(jīng)細(xì)胞損傷現(xiàn)象明顯減少。
　　結(jié)論：改良后的Zea Longa線栓法模型制作更簡(jiǎn)便，穩(wěn)定性更好，模型成功率更高。通過(guò)人工合成E-選擇素對(duì)SD大鼠進(jìn)行干預(yù)能夠明

4、顯減少腦梗死體積及腦組織含水量，并通過(guò)病理切片的觀察結(jié)果，進(jìn)一步證實(shí)人工合成 E-選擇素的對(duì)腦組織的保護(hù)作用。
　　第二部分：人工合成E-選擇素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后腦組織一氧化氮合酶及血清一氧化氮含量表達(dá)的影響
　　目的：探討人工合成E-選擇素對(duì)大鼠局部腦缺血再灌注損傷中腦組織一氧化氮合酶（NOS）及血清中一氧化氮(NO)含量表達(dá)的影響及其作用機(jī)制。
　　方法：采用改良的Zea Longa線栓法建立SD大鼠局

5、灶性腦缺血再灌注損傷模型，將90只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和人工合成E-選擇素治療組，每組30只。各組大鼠在腦缺血2h再灌注2h、6h、12h、24h、72h，5個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別提取血清標(biāo)本和腦組織標(biāo)本。采用硝酸鹽還原法測(cè)定血清中一氧化氮含量和免疫組化法檢測(cè)缺血區(qū)腦組織神經(jīng)型一氧化氮合酶（nNOS）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。數(shù)據(jù)采集后應(yīng)用 SPSS13.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：1. NO結(jié)果（1

6、）對(duì)照組NO變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（2）模型組腦缺血2h再灌注2h~24h區(qū)間NO含量呈上升趨勢(shì)，24h時(shí)達(dá)到高峰，72h已有所降低但仍高于對(duì)照組，各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較明顯增高(P<0.01)。(3)治療組血清中NO含量變化趨勢(shì)同模型組，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果較模型組減少(P<0.05)，較對(duì)照組增多(P<0.01)。
　　2. NOS結(jié)果（1）對(duì)照組nNOS、iNOS陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（2）模型組nNOS陽(yáng)性細(xì)胞在腦缺血2h再灌注2

7、h后開(kāi)始表達(dá)，12h達(dá)到高峰，24h開(kāi)始降低，各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較明顯增高(P<0.01)；模型組iNOS陽(yáng)性細(xì)胞在腦缺血2h再灌注2h開(kāi)始出現(xiàn)，并持續(xù)增多，隨著時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，在24h達(dá)到高峰，72h出現(xiàn)下降，各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較明顯增多(P<0.01)。（3）治療組各時(shí)間點(diǎn)nNOS、iNOS陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)變化趨勢(shì)同模型組，但較模型組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少(P<0.05)，較對(duì)照組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多(P<0.01)。
　　結(jié)論：1．大鼠腦缺