人工合成E-選擇素對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦組織血管細胞粘附分子-1及其mRNA表達的影響.pdf

1、第一部分：改良的大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型的建立及人工合成E-選擇素對腦梗死體積的影響
　　 背景及目的：ZeaLonga等應用線栓阻塞大腦前動脈、頸總動脈及后交通動脈的血流，使大腦中動脈閉塞，拔除線栓后可恢復腦組織血流灌注，形成局灶性腦缺血再灌注損傷模型。本實驗擬通過對傳統(tǒng)ZeaLonga法進行部分改進，建立一種模型成功率更高，穩(wěn)定性更好的模型。應用人工合成E-選擇素干預大鼠，研究其對腦梗死體積的影響。
　　 方法

2、：90只雄性Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠)被隨機分為假手術組、模型組和人工合成E-選擇素治療組。參照ZeaLonga法，采用頸部旁正中切口，術中不結扎翼腭動脈，從頸總動脈切口進線等改進，制作SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型。通過神經行為學評分和2,3,5—氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride，TTC)染色結果，來觀察模型的可靠性和穩(wěn)定性，并應用相關軟件和公式計算腦梗死體積

3、。
　　 結果：模型成功大鼠神經行為學評分為1-3分，缺血區(qū)腦組織經TTC染色后呈蒼白色，改良后模型成功率為80％。治療組大鼠腦梗死體積為233±15mm3，較模型組287±19mm3減少(P＜0.05)。
　　 結論：改良后的模型具有制作簡便，穩(wěn)定性好，模型成功率高的優(yōu)點，是一種用于研究局灶性腦缺血再灌注損傷理想的實驗動物模型。人工合成E-選擇素能夠減少腦梗死體積，具有腦保護作用。
　　 第二部分：人工合成E-

4、選擇素對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后血管細胞粘附分子-1蛋白和mRNA表達的影響
　　 目的：探討人工合成E-選擇素在對大鼠局部腦缺血再灌注損傷中腦組織血管細胞粘附分子-1及其mRNA表達的影響及其作用機制。
　　 方法：42只雄性SD大鼠被隨機分為假手術組、模型組和人工合成E-選擇素治療組。采用改良的ZeaLonga法建立腦缺血再灌注損傷模型，治療組大鼠用人工合成E-選擇素10mg/Kg股靜脈注射體內。免疫組化法觀察缺

5、血區(qū)腦組織中微血管的血管細胞粘附分子-1(vascularcelladhesionmolecule-1，VCAM-1)陽性細胞數(shù)，RT-PCR法觀察其mRNA表達。
　　 結果：1．假手術組：VCAM-1陽性細胞數(shù)少，VCAM-1mRNA表達低。2．模型組：VCAM-1陽性細胞在再灌注2h后開始出現(xiàn)，并持續(xù)增多，在24h后達高峰，72h開始下降，各時間點與假手術組比較明顯增多(P＜0.01);VCAM-1mRNA在再灌注2h后開

6、始表達，12h后達到高峰，24h開始降低，各時間點與假手術組比較明顯增高(P＜0.01)。3．治療組：VCAM-1陽性細胞數(shù)較假手術組多(P＜0.05)，但較模型組少(P＜0.05);VCAM-1mRNA表達較假手術組高(P＜0.05)，但較模型組低(P＜0.05)。
　　 結論：1.大鼠形成局灶性腦缺血再灌注損傷后，缺血區(qū)腦組織中炎性細胞因子積聚，促使血管內皮細胞表面的粘附分子表達上調，表現(xiàn)為VCAM-1mRNA及VCAM-1