重樓提取物對SW480細胞的毒性作用及作用機制研究.pdf

1、目的:以重樓提取液為作用因素,通過測定人結腸癌SW480細胞的抑制率,觀察其形態(tài)學變化,分析人結腸癌細胞周期改變,研究重樓對人結腸癌SW480細胞增殖的影響；并在基因和蛋白質水平檢測干細胞因子(Stem Cell Factor,SCF)在重樓作用后細胞內的表達差異,探討SCF與人結腸癌治療及發(fā)生發(fā)展的關系。
　　 方法:采用10μg/mL、20μg/mL,、40μg/mL、80μg/mL的重樓提取液分別與體外培養(yǎng)的SW480細胞

2、作用12、24、36、48 h,用MTT方法檢測對腫瘤細胞的抑制率。并以IC50作為實驗用藥物濃度,取對數生長期的SW4180細胞,與重樓提取液作用24 h后,通過流式細胞術分析其對SW480細胞周期的影響。并通過RT-PCR和Western-Blotting方法測定SW480細胞干細胞因子的mRNA和蛋白質表達變化,探討藥物抑制作用與細胞內SCF含量之間的關系。
　　 結果:各濃度重樓提取液均對SW480細胞有抑制作用,并存在

3、明顯的劑量.效應、時間-效應關系。重樓提取液作用后的細胞出現明顯變性壞死的形態(tài)改變。流式細胞法分析細胞周期變化的結果顯示:經重樓提取液處理后,SW480細胞在S期的分布比例下降,G0/G1期和G2/M期細胞分布增多(P<0.05);同時干細胞因子表達增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論:重樓提取液對SW480細胞具有明顯細胞毒性及抑制細胞增殖的作用,且這種作用有明顯的劑量.效應、時間-效應關系。重樓提取液可使SW