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文檔簡介
1、目的:探討FOXQ1(Forkhead Box Q1,FOXQ1)基因?qū)Υ竽c癌細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-Mesenchymal transition,EMT)的作用及其可能的機(jī)制。
方法:構(gòu)建針對(duì)人類FOXQ1基因的shRNA慢病毒沉默載體,轉(zhuǎn)染大腸癌細(xì)胞株SW480細(xì)胞,并篩選出沉默效果最好的干擾序列。后續(xù)實(shí)驗(yàn)設(shè)干擾組(感染 FOXQ1-sh1序列)、陰性組(感染 NC-shRNA序列)、對(duì)照組。顯微鏡觀察
2、三組細(xì)胞間形態(tài)學(xué)差異;Transwell小室、細(xì)胞黏附試驗(yàn)觀察三組細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力及黏附能力的差異;qRT-PCR、W estern blot技術(shù)檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP2基因和蛋白水平的差異。
結(jié)果: FOXQ1-sh1慢病毒載體成功沉默了SW480細(xì)胞的FOXQ1的表達(dá)。干擾組與陰性組及對(duì)照組相比,細(xì)胞頂?shù)讟O性及細(xì)胞間緊密連接增加;侵襲、遷移的細(xì)胞數(shù)目顯著減少(P<0.05);同
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