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文檔簡介
1、方法:以攜帶FOXQ1-shRNA的慢病毒載體感染SW480細胞,將細胞株分為FOXQ1-shRNA和NC-shRNA組,利用臍靜脈內(nèi)皮細胞系926細胞行體外血管形成實驗,熒光顯微鏡觀察兩組細胞血管形成能力的差異,MTT、倍增時間、平板克隆形成實驗檢測兩組組細胞的存活率,qRT-PCR、Western blot檢測VEGF-A、MMP2、cyclinD1的mRNA和蛋白水平的表達差異。利用重組 Shh蛋白誘導(dǎo)上述兩組細胞,觀察誘導(dǎo)前后細
2、胞存活率及血管形成能力的變化,檢測上述分子的表達差異。
結(jié)果:與 NC-shRNA組細胞相比,F(xiàn)OXQ1-shRNA組細胞的體外血管形成能力降低,而存活率無明顯變化,qRT-PCR及 Western blot顯示FOXQ1基因沉默后VEGF-A、MMP2的表達下調(diào),cyclinD1表達無差異。與NC-shRNA組比較,重組Shh蛋白誘導(dǎo)的FOXQ1-shRNA體外血管形成能力更低,存活率無明顯差異。
結(jié)論:FOXQ1
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