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文檔簡介
1、隱球菌性腦膜炎(簡稱隱腦)是由隱球菌引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病,該病預(yù)后嚴(yán)重,死亡率高。能致人類發(fā)病的隱球菌主要有新生隱球菌和格特隱球菌,其中新生隱球菌感染多發(fā)生于免疫力低下的人群,突出的表現(xiàn)在艾滋病人人群中,在HIV(+)人群中,每年平均有近百萬的隱球菌感染病例。隨著實體器官移植術(shù)的迅猛發(fā)展以及免疫抑制劑的大量使用,隱腦的發(fā)病率也越來越高。這都說明人體的免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)能力在隱腦的發(fā)病中起著至關(guān)重要的作用。
宿主在隱球菌入侵后
2、產(chǎn)生的免疫反應(yīng)包括天然免疫和適應(yīng)性免疫,天然免疫主要依賴于補(bǔ)體系統(tǒng)和吞噬效應(yīng)因子(包括樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞),適應(yīng)性免疫包括體液免疫和細(xì)胞免疫。不論是補(bǔ)體途徑還是吞噬效應(yīng)都受到機(jī)體適應(yīng)性免疫的調(diào)節(jié)。而輔助T細(xì)胞(Th細(xì)胞)是具有調(diào)節(jié)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫功能的細(xì)胞,當(dāng)Th細(xì)胞被激活時,可以分泌細(xì)胞因子對機(jī)體免疫發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。
鑒于Th1細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子的保護(hù)作用以及Th2細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子的非保護(hù)性作用在多
3、個實驗中已證實,但目前研究發(fā)現(xiàn),除傳統(tǒng)的Th1和Th2細(xì)胞外,Th細(xì)胞還分為Th9、Th17和Th22細(xì)胞,其中Th22細(xì)胞主要與皮膚的病理生理及穩(wěn)態(tài)相關(guān)。所以本研究擬在前期實驗基礎(chǔ)上通過比較初發(fā)隱腦患者在治療前和治療后與正常對照病例外周血中Th9、Th17及其相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),初步探討人體感染隱球菌后的抗菌效應(yīng),尋找可能的治療靶點(diǎn)。
本研究通過流式細(xì)胞儀檢測技術(shù)檢測了12例隱腦患者治療前后及12例正常對照病例外周血中CD4
4、+T細(xì)胞中Th9和Th17細(xì)胞所占比例,通過兩兩比較,發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞在未接受治療的隱腦患者中所占比例較正常對照明顯降低,P<0.05,Th9細(xì)胞在未接受治療的隱腦患者中所占的比例與正常對照相比無統(tǒng)計學(xué)差異;經(jīng)治療后隱腦患者外周血中Th17細(xì)胞所占比例明顯上調(diào),與治療前相比有顯著性差異,剔除治療無好轉(zhuǎn)病例后Th17細(xì)胞所占比例與正常對照相比也有顯著性增高,Th9細(xì)胞所占比例也明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。同時,本實驗還采取實時定量PCR方
5、法比較了上述病例外周血CD4+T細(xì)胞中IL-4、IL-6、IL-9、IL-17、IFN-γ和TGF-β等Th細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)IL-9和IL-17作為Th9和Th17細(xì)胞的主要分泌細(xì)胞因子,呈現(xiàn)出與Th9和Th17細(xì)胞類似的結(jié)果,而TGF-β作為Th17和Th9細(xì)胞的誘導(dǎo)分化細(xì)胞因子,也表現(xiàn)出同樣的表達(dá)趨勢,且TGF-β的表達(dá)水平同IL-9、IL-17都呈明顯正相關(guān),P<0.05,IL-6在隱腦患者治療后外周血CD
6、4+T細(xì)胞中的表達(dá)也較正常對照及治療前明顯升高,且與IL-17的表達(dá)呈正相關(guān)。最后,本實驗還建立了小鼠吸入隱球菌感染模型,通過觀察感染后不同時期小鼠肺組織病理變化與小鼠肺泡巨噬細(xì)胞上相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),發(fā)現(xiàn)隨著小鼠感染病情的加重,巨噬細(xì)胞中TNF-β的表達(dá)水平明顯升高。
我們的研究認(rèn)為TGF-β誘導(dǎo)分化的Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子在隱腦患者抵御隱球菌感染中起重要作用,提示隱腦患者中Th17細(xì)胞的缺乏或不應(yīng)答是導(dǎo)致隱球菌擴(kuò)散至
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