α-,4-β-,2-煙堿受體競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑對(duì)注意缺陷多動(dòng)障礙模型-SHR大鼠非選擇性注意、記憶、行為及α-,4-β-,2-煙堿受體表達(dá)影響的對(duì)照研究.pdf

1、 目的 了解α4β2煙堿受體競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑二氫-β-刺桐啶堿(dihydro-β-erythroidine，DHβE)和哌醋甲酯(methylphenidate，MPD)對(duì)注意缺陷多動(dòng)障礙動(dòng)物模型-自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensiverat；SHR)非選擇性注意(non-selectiveattention，NSA)、自主活動(dòng)能力、學(xué)習(xí)記憶能力的影響，探討α4β2煙堿受體在ADHD行為學(xué)效應(yīng)中的作用機(jī)

2、制。 方法SHR大鼠隨機(jī)分為四組，A組腹腔注射DHβE1ml(1.5mg/kg)；B組腹腔注射哌醋甲酯1ml(10mg/kg)；C組為合并治療組，腹腔注射哌醋甲酯和DHβE1ml(哌醋甲酯10mg/kg，DHβE1.5mg/kg)；D組腹腔注射等體積生理鹽水1ml作為對(duì)照組。單次給藥后30分鐘、24小時(shí)及連續(xù)給藥后7天、14天，Lát迷宮檢測(cè)非選擇性注意水平、開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)檢測(cè)自主活動(dòng)、高架十字迷宮檢測(cè)焦慮相關(guān)行為及Morris水迷宮

3、觀察空間學(xué)習(xí)記憶能力。 結(jié)果(1)非選擇性注意Lát迷宮直立頻率比較：給藥14天MPD與DHβE合用組分別與對(duì)照組、DHβE組比較，直立頻率差異有顯著性(F=3.398，P＜0.05；one-wayANOVA)。Lát迷宮平均直立時(shí)間比較：給藥后24小時(shí)，DHβE組與對(duì)照比較差異有顯著性(P＜0.05)；DHβE組與MPD組比較，在給藥30分鐘、24小時(shí)有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。給藥14天，DHβE組2平均直立時(shí)間降低，

4、MPD組明顯增加，分別與對(duì)照組比較差異有顯著性(P＜0.05)。與MPD比較，DHβE在給藥7天、14天均有顯著差異(P＜0.05)；MPD與DHβE合用組與MPD組比較給藥14天統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著意義(P＜0.05)。 (2)自主活動(dòng)開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)即爬格子數(shù)：?jiǎn)为?dú)使用DHβE與單獨(dú)使用MPD組比較，在給藥30分鐘、7天和14天時(shí)均有顯著性差異(P＜0.05)。MPD和DHBE合用組與單獨(dú)使用DHβE組比較，除24小時(shí)無(wú)差異外，

5、其它各個(gè)時(shí)段的測(cè)驗(yàn)成績(jī)有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。在使用MPD后，SHR運(yùn)動(dòng)力明顯減少，除用藥24小時(shí)外其它檢測(cè)時(shí)間段與對(duì)照組同期比較均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。合并給藥MPD，DHβE組與生理鹽水對(duì)照比較，除用藥24小時(shí)外其它檢測(cè)時(shí)間段與對(duì)照組同期比較均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。 開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)直立運(yùn)動(dòng)：直立動(dòng)作的變化在給藥24小時(shí)各組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；單獨(dú)使用MPD以及MPD和DHβE合用兩組在用藥后30分

6、鐘、7天、14天時(shí)直立動(dòng)作減少，與對(duì)照比較有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。DHβE組與MPD組比較，在30分鐘、7天、14天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。單獨(dú)使用DHβE與MPD+DHβE合用組比較，在7天、14天時(shí)顯示出明顯差異(P＜0.05)。 開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)修飾動(dòng)作：?jiǎn)为?dú)使用DHβE后30分鐘修飾動(dòng)作變化明顯，與MPD以及MPD+DHBE、對(duì)照比較均有差異(P＜0.05)，其它各時(shí)段在各組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。

7、 開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)刻板動(dòng)作：MPD和MPD+DHβE兩組除24h外其它時(shí)間檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。與MPD比較，MPD+DHβE在30分鐘、DHβE在30分鐘、7天、14天時(shí)有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。3而MPD+DHβE與單獨(dú)DHβE比較在30分鐘、7天、14天時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 (3)焦慮相關(guān)行為給藥30分鐘，高架十字迷宮開(kāi)臂次數(shù)比較，MPD+DHβE組明顯減少，與對(duì)照組比較

8、差異有顯著性(P＜0.05)。在給藥14天，MPD+DHβE組、DHβE組高架十字迷宮進(jìn)入開(kāi)臂的次數(shù)減少，與對(duì)照比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。MPD+DHβE組開(kāi)臂時(shí)間減少，分別與MPD組和對(duì)照比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。 (4)水迷宮試驗(yàn)學(xué)習(xí)記憶及空間探索能力各個(gè)組隨時(shí)間的變化逃避潛伏期逐漸縮短，但各組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)；空間探索試驗(yàn)在各組間比較有顯著差異(P＜0.05)，各組穿越原平臺(tái)位置次數(shù)由多到少的順序是

9、MPD組，MPD+DHBE組，生理鹽水組，DHBE組。 結(jié)論(1)a4β2煙堿受體競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑DHβE一定程度上可降低自發(fā)性高血壓大鼠的非選擇性注意水平，而哌醋甲酯則可提高非選擇性注意水平。 (2)在本試驗(yàn)劑量條件下，DHβE對(duì)SHR大鼠的自主活動(dòng)能力影響不明顯，而哌醋甲酯可使SHR大鼠的活動(dòng)水平降低而刻板動(dòng)作增加。DHβE，當(dāng)與MPD合并給藥時(shí)，一定程度上可增加SHR大鼠焦慮相關(guān)行為。(3)哌醋甲酯具有增強(qiáng)SHR學(xué)習(xí)記

10、憶和空間探索能力的趨勢(shì)，而DHβE則相反。 (4)a4β2煙堿受體對(duì)哌醋甲酯的行為學(xué)效應(yīng)有一定的影響作用。 (二)α4β2煙堿受體競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑對(duì)注意缺陷多動(dòng)障礙模型-SHR大鼠α4β2煙堿受體表達(dá)影響的對(duì)照研究目的了解競(jìng)爭(zhēng)性α4β2煙堿受體拮抗劑二氫-β-刺桐啶堿(dihydro-β-erythroidine，DHβE)、哌醋甲酯(methylphenidate，MPD)對(duì)注意缺陷多動(dòng)障礙動(dòng)物模型-自發(fā)性高血壓大鼠(sp

11、ontaneouslyhypertensiverat；SHR)大腦皮層和海馬區(qū)域a4β2煙堿受體及其mRNA表達(dá)水平的影響，探討煙堿受體系統(tǒng)在注意缺陷多動(dòng)障礙治療中的作用機(jī)制。 方法SHR大鼠隨機(jī)分為四組，SHR大鼠隨機(jī)分為四組，A組腹腔注射DHβE(1.5mg/kg)；B組腹腔注射哌醋甲酯(10mg/kg)；C組為合并治療組，腹腔注射哌醋甲酯和DHβE(哌醋甲酯10mg/kg，DHβE1.5mg/kg)；D組腹腔注射等體積生理

12、鹽水1ml作為對(duì)照組。每天給藥一次，連續(xù)給藥14天后，取大腦組織，切片，用免疫組織化學(xué)染色、原位雜交技術(shù)檢測(cè)a4、β2煙堿受體及其mRNA在皮層和海馬的表達(dá)水平。 結(jié)果注射二氫-β-刺桐啶堿、二氫-β-刺桐啶堿合并哌醋甲酯后，a4和β2煙堿受體在皮層和海馬區(qū)域表達(dá)強(qiáng)度降低，與對(duì)照比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。在皮層、海馬，各組間a4、β2煙堿受體mRNA表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 結(jié)論a4β2煙堿受體拮抗