HSP60特異性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的誘導(dǎo)及其對(duì)小鼠動(dòng)脈粥樣硬化影響.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：天然CD4+CD25+T細(xì)胞對(duì)ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化影響
　　 目的: 探討ApoE-/-小鼠CD4+CD25+T細(xì)胞的比例和功能及其與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系。
　　 方法: 從apoE-/-小鼠外周血流式細(xì)胞儀（FCA）檢測(cè)CD4+CD25+T細(xì)胞的比例并分分選之；混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（MLR）研究CD4+CD25+T細(xì)胞的免疫抑制功能；ELISA法測(cè)定上清液中細(xì)胞因子IL-

2、10、TGF-β濃度；觀察ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣斑塊的形成狀況。
　　 結(jié)果:與正常小鼠相比，ApoE-/-小鼠外周血中CD4+CD25+T細(xì)胞數(shù)量無(wú)差異，但抑制naive T細(xì)胞增殖能力弱，分泌更少IL-10、TGF-β；ApoE-/-小鼠斑塊面積較大。
　　 結(jié)論: ApoE-/-小鼠CD4+CD25+T細(xì)胞抑制功能弱，可能因此免疫失穩(wěn)而致動(dòng)脈粥樣硬化。
　　 第二部分：HSP60特異性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的誘導(dǎo)

3、及其對(duì)小鼠動(dòng)脈粥樣硬化影響
　　 目的: 探討抗原特異性CD4+CD25+T細(xì)胞的體外誘導(dǎo)及其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的影響。
　　 方法: 從apoE-/-小鼠分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，經(jīng)雷帕霉素（RPM）處理培養(yǎng)出未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）；體外誘導(dǎo)HSP60特異性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化；流式細(xì)胞儀（FCA）檢測(cè)及分選CD4+CD25+T細(xì)胞；混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（MLR）研究CD4+CD25+T細(xì)胞的特異性抑制效應(yīng)；ELISA法測(cè)定上

4、清液中細(xì)胞因子IL-10、TGF-β和IFN－γ濃度。過(guò)繼轉(zhuǎn)移CD4+CD25+T細(xì)胞后，觀察小鼠動(dòng)脈粥樣斑塊的形成狀況。
　　 結(jié)果: 雷帕霉素處理的DC共刺激分子CD80和CD86表達(dá)明顯減少，形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞；未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞比成熟樹(shù)突狀細(xì)胞能誘導(dǎo)更多CD4+CD25+T細(xì)胞；培養(yǎng)體系中細(xì)胞因子IL-10、TGF-β水平明顯升高；CD4+CD25+T細(xì)胞能抑制效應(yīng)性T細(xì)胞的增殖及IFN－γ的分泌。過(guò)繼HSP60