昆蟲病原線蟲大量繁殖技術(shù)研究.pdf

1、昆蟲病原線蟲(Entomopathogenicnematode)是20世紀(jì)初發(fā)展起來的一種很有潛能的生物防治因子，但由于繁殖技術(shù)不成熟，制約了昆蟲病原線蟲的大面積推廣應(yīng)用。為了篩選出適應(yīng)市場需求的昆蟲病原線蟲繁殖技術(shù)，本試驗采用不同方法進行大量繁殖，通過評價繁殖線蟲的產(chǎn)量、質(zhì)量、成本和效率，試圖找到一種經(jīng)濟而高效的方法，以期為昆蟲病原線蟲規(guī)模化生產(chǎn)提供理論依據(jù)和實踐指導(dǎo)。 本研究在中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所進行，以大蠟螟

2、(Galleriamellonella)為寄主昆蟲的Whitetrap傳統(tǒng)繁殖線蟲法為對照，采用以當(dāng)?shù)厝菀撰@得的黃粉蟲(Tenebriomolitor)為寄主昆蟲、以布袋為繁殖容器的Lowtek法、以共生細(xì)菌——線蟲建立的液體繁殖和固體繁殖法大量培養(yǎng)異小桿線蟲Heterorhabditisbacteriophora-1(Hb-1)和斯氏線蟲Steinernemacarpocapsae-2(Sc-2)進行比較。結(jié)果如下： Lowt

3、ek法以黃粉蟲為寄主昆蟲，進行活體繁殖線蟲，篩選出價格便宜的蛭石為培養(yǎng)介質(zhì)，Hb-1和Sc-2接種量分別為每克黃粉蟲800侵染期線蟲(IJs)和1600IJs，培養(yǎng)介質(zhì)和寄主昆蟲(黃粉蟲)混合最適比例為3：2。培養(yǎng)介質(zhì)不滅菌，繁殖袋不翻動更好；Hb-1在接種第12d和第15d進行收獲，Sc-2在接種第10d和第13d進行收獲。收獲后采用過濾處理進行儲存，線蟲的存活率明顯高于沉淀后直接儲存的線蟲。 TSYS液體培養(yǎng)，接種單菌線蟲是

4、非單菌線蟲產(chǎn)量的2.1倍、效率是3.5倍。TSYS液體培養(yǎng)線蟲的產(chǎn)量和效率也明顯高于PSYG液體培養(yǎng)。液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)Hb-1線蟲均在第17d開始收獲，Sc-2線蟲均在第11d收獲。固體培養(yǎng)線蟲的產(chǎn)量和效率是液體培養(yǎng)的3.7倍。 從不同方法繁殖線蟲產(chǎn)量和質(zhì)量測定結(jié)果可以看出，每克培養(yǎng)基質(zhì)，固體培養(yǎng)線蟲的產(chǎn)量顯著高于其他方法，其次是液體培養(yǎng)，而Whitetrap法與Lowtek法的產(chǎn)量較低，二者之間沒有顯著差異。4種繁殖方法生產(chǎn)

5、的線蟲均有良好的致病力，傳統(tǒng)的Whitetrap法生產(chǎn)的線蟲使大蠟螟致病快，侵染12h后的死亡率顯著高于其他方法，但到48h時固體培養(yǎng)法和Lowtek法與Whitetrap法無顯著差異。線蟲繁殖成本和效率核算結(jié)果表明，在不考慮生產(chǎn)必需設(shè)備成本和技術(shù)人員的專業(yè)水平情況下，Lowtek法和固體培養(yǎng)法獲得的線蟲成本較低，二者之間無顯著差異，但固體培養(yǎng)法的效率最高。因此，Hb-1和Sc-2線蟲的產(chǎn)量和效率順序為：固體培養(yǎng)〉液體培養(yǎng)〉Whitet