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1、目的:建立家兔神經(jīng)源性休克死亡模型,運(yùn)用比較蛋白質(zhì)組學(xué)篩選神經(jīng)源性休克死亡組與正常對(duì)照組表達(dá)差異的蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)潛在的神經(jīng)源性休克生物標(biāo)記物,為診斷神經(jīng)源性休克死亡提供客觀依據(jù),探索神經(jīng)源性休克死亡的機(jī)制。
方法:⑴采用外力打擊家兔頸動(dòng)脈竇建立神經(jīng)源性休克死亡模型。⑵采用雙向凝膠電泳技術(shù)分離神經(jīng)源性休克死亡組及正常對(duì)照組左心室全蛋白,用PDQUEST8.0軟件分析雙向凝膠電泳圖譜,篩選出表達(dá)顯著差異的蛋白點(diǎn),胰酶酶解后,用H
2、PLC-Chip/MS進(jìn)行在線分析、鑒定出差異表達(dá)蛋白質(zhì)。⑶利用Mascot軟件在UniProtKB/SWISS-PORT數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選差異表達(dá)蛋白質(zhì),進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲取差異蛋白質(zhì)相關(guān)肽段的MS/MS質(zhì)譜圖。
結(jié)果:①成功驗(yàn)證了前期研究中神經(jīng)源性休克死亡的動(dòng)物模型。②篩選出8個(gè)神經(jīng)源性休克死亡組表達(dá)上調(diào)的蛋白質(zhì),分別是:角蛋白10、角蛋白15、α-2B腎上腺素能受體、線粒體過(guò)氧化物歧化酶、過(guò)氧化物酶增殖物激活受體δ、封
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