地鱉纖溶活性蛋白(EFP)分離純化、紅外光譜分析及抑制雞胚尿囊膜(CAM)血管生成研究.pdf

1、地鱉（EupolyphagasinensisWalker）又名土元，地鱉蟲，屬蜚蠊目（Blattaria）鱉蠊科（Corydiidae）真鱉蠊屬（Eucorydia），是祖國醫(yī)學中一傳統(tǒng)活血化瘀類中藥，為《中華人民共和國藥典》記載的正品藥材，雌性全蟲入藥。隨著中醫(yī)藥的發(fā)展，地鱉蟲的藥理研究越來越深入，在醫(yī)療保健中越來越多地得到應用。 以傳統(tǒng)中藥材地鱉為原料，采用勻漿、鹽析、硫酸銨分段沉淀、透析和DEAE-52纖維素離子層析等純化

2、方法，從其體內(nèi)分離純化得到一種纖溶活性蛋白（FibrinolyricProteinofEupolyphagasinensisWalker，EFP），采用SDS-PAGE電泳法對其進行了分子量和純度測定，采用bradfore法測得其中的蛋白含量，采用蒽酮法測的總糖含量，采用纖維蛋白平板法測定EFP纖溶活性，采用紅外光譜分析其主要官能團，采用雞胚尿囊膜法在器官和體內(nèi)水平觀察EFP對新生血管生成的抑制效應，以小老鼠為實驗對象對地鱉蛋白的溶血活

3、性，出血性和凝血酶時間作用進行實驗。 結(jié)果表明，從地鱉中提取純化的EFP為相對分子量為41.3kD的單一成分，具有顯著地纖溶活性，其中蛋白質(zhì)含量為16.93mg/ml，蛋白質(zhì)含量為紅外光譜特征吸收峰表現(xiàn)蛋白質(zhì)和糖的紅外光譜特征吸收峰，推斷EFP為一種糖蛋白，總糖含量為7.01％。EFP對雞胚尿囊膜新生血管生成有良好的抑制作用，比陽性對照（地塞米松組）對雞胚生長發(fā)育影響較小。地鱉蟲纖溶活性蛋白組分具有抑制血管生成的作用，有可能用于