蘋果多糖的分離純化及其自由基消除活性與紅外光譜分析.pdf

1、本研究以陜西恒興果汁有限公司眉縣分公司在2005年8月下旬生產(chǎn)蘋果濃縮汁后產(chǎn)生的蘋果渣為原料，采用一次多級(jí)提取工藝提取制備蘋果多糖，并與酸提果膠工藝提取果膠多糖相對(duì)比、經(jīng)過分離純化，然后對(duì)各均一多糖組分進(jìn)行體外自由基消除活性分析，并采用FTIR對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步的測(cè)定。結(jié)果表明： (1)多糖提取液以TCA法，沉淀3次脫蛋白效果最好，脫蛋白率達(dá)到23.87％，多糖損失率僅為0.40％。多糖脫色則以透析法效果最佳，脫色處理后可使多糖液

2、透光率提高20.70％，多糖達(dá)到乳白色，符合生產(chǎn)上的要求。 (2)采用TOYOPEARL DEAE-650M纖維素柱和TOYOPEARL HW-55F凝膠柱分別對(duì)蘋果多糖進(jìn)行分離純化結(jié)果為：水提蘋果多糖WMPP含WMPP1、WMPP2和 WMPP3三種組分，得率分別為72、312.6和80.2g/kg。酸提蘋果多糖HAMPP含HAMPP1、 HAMPP2、HAMPP3以及HAMPP'1、HAMPP'2、HAMPP'3六種組分，得

3、率分別為367.6、176.2、79.7g/kg以及141.4、237.4、101.3g/kg。酸提果膠多糖HAMPPE含 HAMPPE1、HAMPPE2和HAMPPE3三種組分，得率分別為190.1、314.2和73.7g/kg。 (3)水提蘋果多糖WMPP、酸提蘋果多糖HAMPP和酸提果膠多糖HAMPPE三種多糖半純品以及純品對(duì)DPPH·自由基都有一定的消除能力，并在一定的濃度范圍內(nèi)隨著濃度增大，其消除能力也增強(qiáng)。

4、(4)半抑制濃度測(cè)定結(jié)果顯示，水提蘋果多糖WMPP及其3種組分WMPP1、WMPP2和WMPP3對(duì)DPPH·自由基都有一定的消除能力，對(duì)自由基DPPH·的半抑制濃度IC50分別為2mg/mL、3.6 mg/mL、10mg/mL和4.8mg/mL。其中水提多糖粗品的半抑制濃度最低，也就是說其消除自由基(DPPH·)的能力最強(qiáng)，其次才是各純品組分，其中最強(qiáng)的是 WMPP1，WMPP3次之，最差的是WMPP2。 (5)酸提多糖HAMP

5、P以及其各組分HAMPP1、HAMPP2和HAMPP3對(duì)自由基(DPPH·)的半抑制濃度IC50分別為1.7mg/mL、3.4 mg/mL、6.9mg/mL和5mg/mL。其中酸提多糖粗品的半抑制濃度最低，也就是說其消除自由基(DPPH·)的能力最強(qiáng)，其次才是各純品組分其中最強(qiáng)的是HAMPP1，HAMPP3次之，最差的是HAMPP2。 (6)酸提多糖HAMPP'以及其各組分HAMPP'1、HAMPP'2和HAMPP'3對(duì)自由基

6、(DPPH·)的半抑制濃度IC<,50>分別為0.6mg/mL、0.5 mg/mL、4.6mg/mL和4.9mg/mL。其中HAMPP'1的半抑制濃度最低，也就是說其消除自由基(DPPH·)的能力最強(qiáng)，其次是酸提多糖粗品HAMPP，純品：HAMPP'2次之，最差的是HAMPP'3。 (7)酸提果膠多糖HAMPPE以及其各組分HAMPPE1、HAMPPE2和HAMPPE3對(duì)自由基(DPPH)的半抑制濃度IC<,50>分別為4.4m

7、g/mL、5.5 mg/mL、11mg/mL和8.4mg/mL。其中酸提果膠多糖粗品的半抑制濃度最低，也就是說其消除自由基(DPPH·)的能力最強(qiáng)，其次才是各純品組分其中最強(qiáng)的是HAMPPE1，HAMPPE3次之，最差的是HAMPPE2。 (8)各多糖純品的FTIR紅外譜均顯示了多糖的結(jié)構(gòu)特征，除此之外，水提多糖組分1-WMPP1的紅外光譜顯示了氨基結(jié)構(gòu)的特征吸收峰，WMPP1很可能為一種氨基多糖并同時(shí)由α和β-D-型的吡喃甘露

8、糖以及α-木糖組成；組分2-WMPP2可能也是一種氨基多糖，但主要由D-吡喃葡萄糖脫氧鼠李糖和α-D-吡喃木糖組成，組分3-WMPP3是一種更為簡(jiǎn)單的主要由α-D-吡喃木糖組成。 (9)酸提多糖HAMPP和IHAMPP'各自的三個(gè)純品組分的FTIR紅外光譜圖表現(xiàn)出極為一致的對(duì)應(yīng)相似性。它們的組分2為含有D-甘露糖及β-D-吡喃葡萄糖和α-D-吡喃木糖組成的酸性多糖；組分3則為含有β-D-甘露糖、α-D-吡喃半乳糖、β-D-吡喃葡