運(yùn)用SELDI-TOF-MS技術(shù)建立結(jié)直腸癌和結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移診斷預(yù)測(cè)模型研究.pdf

1、目的：運(yùn)用SELDI-TOF-MS技術(shù)尋找與結(jié)直腸癌以及結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白質(zhì)，建立血清蛋白質(zhì)指紋圖譜診斷預(yù)測(cè)模型，并進(jìn)行驗(yàn)證和評(píng)價(jià)。 方法：選取復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院普外科2005年3月-2006年12月，普外科結(jié)直腸癌病例72例，另選取正常人群36例作為對(duì)照，分為結(jié)直腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組(n=36)、結(jié)直腸癌合并肝轉(zhuǎn)移組(n=36)及正常對(duì)照組三組(n=36)，術(shù)前空腹外周靜脈采血，采用弱陽(yáng)離子交換蛋白質(zhì)芯片(CMI0)為檢測(cè)介質(zhì)

2、，經(jīng)表面加強(qiáng)激光解吸電離-飛行時(shí)間-質(zhì)譜(SELDI-TOF-MS)測(cè)定，得到蛋白質(zhì)指紋圖譜并運(yùn)用BioMarker wizard軟件分析比較，建立結(jié)直腸癌和結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的診斷預(yù)測(cè)模型。另外分別選取44例結(jié)直腸癌患者、44例結(jié)直腸癌合并肝轉(zhuǎn)移和44位正常人群行盲法驗(yàn)證，對(duì)所建立的診斷預(yù)測(cè)模型進(jìn)行評(píng)估分析。 結(jié)果： 1)通過(guò)結(jié)直腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組與正常對(duì)照組比較，得到7個(gè)差異蛋白峰，并以此建立診斷預(yù)測(cè)模型，其敏感性為100％

3、，特異性為100％。驗(yàn)證結(jié)果敏感性為95.45％，特異性為77.27％。 2)通過(guò)結(jié)直腸癌合并肝轉(zhuǎn)移組與正常對(duì)照組比較，得到17個(gè)差異蛋白峰，并以此建立診斷預(yù)測(cè)模型，其敏感性為94.45％，特異性為100％。驗(yàn)證結(jié)果敏感性為77.27％，特異性為81.82％。 3)通過(guò)將整個(gè)結(jié)直腸癌組及正常對(duì)照組比較，得到5個(gè)差異蛋白峰，并以此建立診斷預(yù)測(cè)模型，其敏感性為100％，特異性為97.22％。驗(yàn)證結(jié)果敏感性為71.59％，特異

4、性為75％。 4)通過(guò)結(jié)直腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組及結(jié)直腸癌合并肝轉(zhuǎn)移組比較，得到10個(gè)差異蛋白峰，并以此建立診斷預(yù)測(cè)模型，其敏感性為91.67％，特異性為97.22％。驗(yàn)證結(jié)果敏感性為75％，特異性為81.82％。 5)m/z=8.9kD與13.8kD的蛋白質(zhì)均存在于結(jié)直腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組VS正常組，以及結(jié)直腸癌合并肝轉(zhuǎn)移組VS正常組兩組比較中，并分別出現(xiàn)于全部結(jié)直腸癌組VS正常組與結(jié)直腸癌合并肝轉(zhuǎn)移組VS結(jié)直腸癌無(wú)肝轉(zhuǎn)移組中，提示

5、與結(jié)直腸癌及明顯相關(guān)。 6)血清蛋白指紋診斷預(yù)測(cè)模型，具有敏感性91％，特異性97％的良好預(yù)測(cè)結(jié)果，與CEA相比，具有非常大的優(yōu)越性。CEA的敏感性及特異性大約在65％左右。 結(jié)論： 1)運(yùn)用SELDI-TOF-MS技術(shù)所建立的血清蛋白指紋圖譜模型在預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌以及結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中具有非常高的敏感性與特異性，可望成為很好的預(yù)測(cè)診斷工具。 2)通過(guò)進(jìn)一步的分離和鑒定，m/z=8.9kD與13.8kD的蛋白很