胃癌螺旋CT征象、組織病理與COX-2及nm23-H-,1-表達(dá)的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分：胃癌螺旋CT征象與手術(shù)病理及組織分化相關(guān)性研究 背景與目的：目前臨床應(yīng)用經(jīng)驗較成熟、結(jié)果較準(zhǔn)確、實用價值較大者為螺旋CT。研究顯示，低張力水充盈螺旋CT三期增強(qiáng)掃描可全面評價胃癌的浸潤及轉(zhuǎn)移，準(zhǔn)確評估術(shù)前分期。 方法：對57例胃癌病人術(shù)前行低張力水充盈螺旋CT三期增強(qiáng)掃描，掃描前空腹，檢查前10min肌注鹽酸654-220mg，口服溫水800-1200ml。先行平掃，然后分別于注射非離子型對比劑開始后25s(動

2、脈期)，65-70s(門靜脈期)，3-4min(延遲期)進(jìn)行增強(qiáng)掃描。57例病人均于檢查后一周內(nèi)施行胃癌切除術(shù)，并將螺旋CT結(jié)果與手術(shù)病理及組織分化進(jìn)行對照。 結(jié)果：1.螺旋CT對T、N、M和TNM分期的準(zhǔn)確性分別為82.46％(47/57)、78.95％(45/57)、100％(4/4)和80.70％(46/57)，均與術(shù)后病理分期相關(guān)(P＜0.005)。2.高/中分化癌與低分化癌的螺旋CT征象之間差異有顯著性(P＜0.05)

3、，螺旋CT征象包括病灶大小、厚度、強(qiáng)化特點、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。3.胃癌病灶厚度大于15mm、大小超過50mm、動脈期-門靜脈期呈彌漫型強(qiáng)化多為低分化癌，其漿膜侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的幾率較高，多為Ⅲ+Ⅳ分期。4.胃癌病灶厚度小于15mm、大小小于50mm、動脈期-門靜脈期呈腸型強(qiáng)化多為高/中分化癌，其漿膜侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的幾率較低，多為Ⅰ+Ⅱ分期。5.螺旋CT示胃癌浸潤多個胃區(qū)、鄰近臟器侵犯(T4)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(M1)者均為低分化

4、癌。6.螺旋CT示有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(N1+2)、遠(yuǎn)組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(N2)和Ⅲ+Ⅳ分期中分別有76.92％、84.62％和84.62％為低分化癌。7.螺旋CT示無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(N0)、近組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(N0+1)和Ⅰ+Ⅱ分期中分別有61.11％、51.61％和77.78％為高/中分化癌。 結(jié)論：1.胃癌螺旋CT的TNM分期與手術(shù)病理相關(guān)。2.胃癌螺旋CT征象包括病灶大小、厚度、強(qiáng)化特點、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，與手術(shù)病理、組織分化之

5、間具有相關(guān)性。3.胃癌螺旋CT三期增強(qiáng)掃描的術(shù)前組織病理學(xué)評估對臨床治療有重要的指導(dǎo)意義，有助于胃癌浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的正確評估。 第二部分:胃癌組織中COX-2、nm23-H1蛋白和mRNA表達(dá)的研究 背景與目的：胃癌是是世界范圍內(nèi)發(fā)病率及死亡率均較高的惡性疾病。研究表明，胃癌的發(fā)生是以多個原癌基因激活和抑癌基因失活為基礎(chǔ)的多步驟多階段過程，并通過其表達(dá)產(chǎn)物作用于細(xì)胞生長、分化及代謝過程，最終導(dǎo)致癌變。環(huán)氧合酶-2(CO

6、X-2)，是一種誘導(dǎo)型酶，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。轉(zhuǎn)移抑制基因23(nm23)-H1對腫瘤轉(zhuǎn)移有抑制作用，是目前分離到的對腫瘤轉(zhuǎn)移起著負(fù)調(diào)控作用的最具代表性的基因，nm23-H1與消化道腫瘤關(guān)系較為密切，其低表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。本研究采用免疫組化SP法、原位雜交和RT-PCR等技術(shù)，多方位檢測了57例胃癌組織中COX-2、nm23-H1蛋白和mRNA的表達(dá)情況，探討相互之間的內(nèi)在聯(lián)系。 方法：1.采用免疫組

7、化SP技術(shù)對57例胃癌組織中COX-2和nm23-H1的蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測。2.采用原位雜交、RT-PCR等技術(shù)對57例胃癌組織中COX-2和nm23-H1的mRNA表達(dá)進(jìn)行檢測。3.統(tǒng)計學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS11.0軟件進(jìn)行x2檢驗(chi-square)，兩變量之間的關(guān)系分析采用相關(guān)分析。顯著性水準(zhǔn)a=0.05。 結(jié)果：1.COX-2蛋白免疫組化結(jié)果：57例胃癌組織中，COX-2蛋白表達(dá)32例，陽性表達(dá)率為56.14％。

8、與腫瘤大小、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及Lauren分型明顯相關(guān)(P＜0.05)，而與組織分化不相關(guān)(P＞0.05)。2.COX-2基因原位雜交及RT-PCR結(jié)果：COX-2基因原位雜交結(jié)果與RT-PCR結(jié)果具有明顯的一致性。57例胃癌組織中，COX-2mRNA表達(dá)42例，陽性表達(dá)率為73.68％。與腫瘤大小、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及Lauren分型明顯相關(guān)(P＜0.05)，而與組織分化不相關(guān)(P＞0.05)。3.nm2

9、3-H1蛋白免疫組化結(jié)果：57例胃癌組織中，nm23-H1蛋白表達(dá)26例，陽性表達(dá)率為45.61％。在漿膜侵犯組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、TNM分期組和組織分化組有顯著性差異(P＜0.05)，而在腫瘤大小組和Lauren分型組無顯著性差異(P＞0.05)。4.nm23-H1基因原位雜交及RT-PCR結(jié)果：nm23-H1基因原位雜交結(jié)果與RT-PCR結(jié)果具有明顯的一致性。57例胃癌組織中，nm23-H1mRNA表達(dá)30例，陽性表達(dá)率為52.63％

10、。在漿膜侵犯組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、TNM分期組和組織分化組有顯著性差異(P＜0.05)，而在腫瘤大小組和Lauren分型組無顯著性差異(P＞0.05)。5.COX-2蛋白陽性表達(dá)率與mRNA陽性表達(dá)率及nm23-H1蛋白陽性表達(dá)率與mRNA陽性表達(dá)率之間均無相關(guān)性(P＞0.05)。6.COX-2與nm23-H1蛋白表達(dá)及mRNA表達(dá)之間均無相關(guān)性(P＞0.05)。 結(jié)論：1.首次聯(lián)合運(yùn)用免疫組化、原位雜交和RT-PCR技術(shù)檢測了胃癌

11、組織中COX-2、nm23-H1蛋白和mRNA表達(dá)情況，從而闡明了COX-2、nm23-H1蛋白和mRNA表達(dá)與胃癌浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系。2.COX-2蛋白及mRNA表達(dá)與胃癌的T分期、N分期及TNM均相關(guān)，提示COX-2基因與胃癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移有關(guān)。3.COX-2蛋白及mRNA表達(dá)與腫瘤大小均相關(guān)，提示較大腫瘤產(chǎn)生較多量的COX-2，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的生長。4.nm23-H1蛋白及mRNA表達(dá)與胃癌的T分期、N分期及TNM均相關(guān)，提示

12、nm23-H1基因與胃癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移有關(guān)。5.nm23-H1蛋白及mRNA表達(dá)與胃癌組織分化相關(guān)，提示胃癌組織的分化程度與轉(zhuǎn)移潛能密切相關(guān)，低分化胃癌組織更具轉(zhuǎn)移傾向。6.COX-2蛋白、mRNA表達(dá)與nm23-H1蛋白、mRNA表達(dá)均不相關(guān)，提示COX-2促進(jìn)腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移和nm23-H1抑制腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移可能是通過各自獨立的途徑發(fā)揮作用。 第三部分:胃癌螺旋CT征象與COX-2和nm23-H1表達(dá)相關(guān)性研究

13、 背景和目的：腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移一直是導(dǎo)致患者死亡的主要因素，也是決定其治療方案制定的重要因素。對比研究顯示，低張力水充盈螺旋CT三期增強(qiáng)掃描可全面評價胃癌的浸潤和轉(zhuǎn)移，是胃癌術(shù)前分期的可靠檢查方法。腫瘤的螺旋CT表現(xiàn)有其特定的病理學(xué)基礎(chǔ)，分子生物學(xué)可從基因、蛋白水平反映病理學(xué)改變。研究表明COX-2是一種誘導(dǎo)型前列腺素合成過程中的限速酶，它將花生四烯酸代謝成各種前列腺素產(chǎn)物，參與維持機(jī)體的各種生理和病理功能，與人類消化道腫瘤密切相關(guān)。而

14、nm23-H1基因是抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的最佳候選基因，其mRNA或其基因產(chǎn)物的低表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移具有很高的相關(guān)性。本研究將胃癌的螺旋CT征象與COX-2和nm23-H1表達(dá)相對照，旨在探討胃癌螺旋CT表現(xiàn)與病理學(xué)和分子生物學(xué)的關(guān)系，研究螺旋CT胃癌浸潤及轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性。 影像學(xué)表現(xiàn)與基因、蛋白表達(dá)以病理形態(tài)學(xué)為中介存在某種必然的聯(lián)系，針對胃癌的螺旋CT表現(xiàn)特征：如厚度、大小、強(qiáng)化特點、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期等與COX-2、n

15、m23-H1表達(dá)的相互關(guān)系進(jìn)行探討。研究胃癌螺旋CT征象與基因、蛋白表達(dá)間的關(guān)系，從影像學(xué)角度評價胃癌的分子生物學(xué)行為，為腫瘤預(yù)后判斷及治療方案的選擇提供更確實的依據(jù)，有關(guān)胃癌螺旋CT征象與COX-2、nm23-H1表達(dá)的研究國內(nèi)外尚未見報道。 方法：本組對57例胃癌行低張力水充盈螺旋CT三期增強(qiáng)掃描，并與手術(shù)病理對照。術(shù)后標(biāo)本分別采用免疫組織化SP法、原位雜交及RT-PCR技術(shù)檢測腫瘤組織中COX-2、nm23-H1的表達(dá)。實

16、驗數(shù)據(jù)采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料用x2檢驗，等級相關(guān)分析采用Spearman等級相關(guān)分析法，取a=0.05為顯著性檢驗水準(zhǔn)。 結(jié)果：1.螺旋CT三期增強(qiáng)掃描對57例胃癌T分期的準(zhǔn)確性為82.46％，N分期的準(zhǔn)確性為78.95％，TNM分期的準(zhǔn)確性為80.70％。2.57例胃癌組織中，COX-2蛋白的陽性表達(dá)率為56.14％，COX-2mRNA的陽性表達(dá)率為73.68％，與螺旋CT征象上的腫瘤厚度、大小、

17、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)(P＜0.05)，而與腫瘤強(qiáng)化方式不相關(guān)(P＞0.05)。3.57例胃癌組織中，nm23-H1蛋白的陽性表達(dá)率為45.61％，nm23-H1mRNA的陽性表達(dá)率為52.63％，與螺旋CT征象上的腫瘤厚度、大小、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期明顯相關(guān)(P＜0.05)，而與腫瘤強(qiáng)化方式不相關(guān)(P＞0.05)。4.57例胃癌組織中，COX-2蛋白與nm23-H1蛋白在胃癌中表達(dá)不相關(guān)(P＞0.05)；CO