FHIT及nm23-H-,1-基因編碼蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理生物學(xué)行為.pdf

1、前言發(fā)生發(fā)展涉及多種原癌基因的激活和抑癌基因的失活.1996年Ohta等用差異顯示分析探針和外顯子捕獲法確定了一個(gè)新的基因,由于該基因氨基酸測序結(jié)果與組氨酸三聯(lián)體(histidine triad,HIT)蛋白具有高度同源性,而基因內(nèi)又包含有FRA3B脆性位點(diǎn),因此命名為脆性組氨酸三聯(lián)體基因(Fragile Histidine Triad,FHIT).許多學(xué)者對多種腫瘤的FHIT基因進(jìn)行了不同層面的研究,發(fā)現(xiàn)在絕大多數(shù)腫瘤中存在FHIT基

2、因的異常,認(rèn)為FHIT基因是一重要的候選抑癌基因.以往研究證明,nm23-H1基因與腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移抑制有關(guān).該研究用免疫組化方法對Fhit及nm23-H<,1>蛋白在胃癌組織中的表達(dá)進(jìn)行了檢測,并分析了基因表達(dá)與胃癌臨床病理因素之間的關(guān)系,為探討FHIT及nm23-H<,1>基因在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用.方法1.免疫組化方法該實(shí)驗(yàn)免疫組化染色采用美國GBI技術(shù)有限公司近年推出的免疫組化檢測二步法.Immuno-Bridge+試劑盒,

3、兔抗人Fhit多克隆抗體(工作濃度1∶50)和鼠抗人nm23單克隆抗體(工作濃度1∶100)均購白北京中山生物技術(shù)有限公司,用PBS代替一抗作陰性對照.免疫組化染色結(jié)果判定以中山公司贈(zèng)送陽性切片為陽性對照,以PBS代替一抗作陰性對照.結(jié)果判定:FHIT和nm23-H<,1>蛋白免疫染色陽性信號定位于細(xì)胞漿,呈棕黃色顆粒.每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞,取平均值.陽性細(xì)胞數(shù)<5％為陰性(-),5％-25％為弱陽性(