喉鱗癌組織中nm23-H-,1-、bFGF和MVD的檢測(cè)及其相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的 喉鱗狀細(xì)胞癌(laryngeal squamous carcinoma，LSCC)是頭頸部常見(jiàn)的惡性腫瘤，在我國(guó)部分省市的發(fā)病率約為1.5～3.4/10萬(wàn)人，占頭頸腫瘤的13.9％，占全身惡性腫瘤的2.1％，近幾年來(lái)其發(fā)病率有日益增高的趨勢(shì)。對(duì)于單純LSCC病人，可以通過(guò)手術(shù)切除的方式得到較好的治療效果，其術(shù)后5年生存率能達(dá)到80％。而對(duì)于伴頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人，即使通過(guò)頸清掃及術(shù)后的放療，其5年生存率僅為46.2％

2、，死亡率明顯上升。 腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，是多步驟，多基因協(xié)同作用的結(jié)果，其中轉(zhuǎn)移抑制基因的失活和腫瘤血管生成是轉(zhuǎn)移發(fā)生的必要步驟。nm23-H<,1>是研究的較深入的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，已在多種惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)nm23-H<,1>的低表達(dá)與轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后等呈負(fù)相關(guān)。但臨床上也有相反的報(bào)告，有些腫瘤組織中的nm23-H<,1>基因表達(dá)水平缺失與腫瘤是否轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后無(wú)關(guān)，甚至有的腫瘤在其發(fā)生轉(zhuǎn)移時(shí)nm23-H<,1>的

3、表達(dá)反而增高，以上這些相互矛盾的結(jié)論，說(shuō)明人們對(duì)nm23-H<,1>的認(rèn)識(shí)還很不夠，還需更深入的研究。 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor bFGF)最早是從牛垂體中分離到的一種堿性蛋白，其在體內(nèi)分布廣泛，存在于神經(jīng)組織、骨骼、生殖器官、腺體、白細(xì)胞等以及多種腫瘤細(xì)胞中。它與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后可刺激細(xì)胞的增殖、分化，誘導(dǎo)新生血管的形成。 通過(guò)觀察喉鱗狀細(xì)胞癌中nm23-

4、H<,1>、bFGF蛋白的表達(dá)和MVD的檢測(cè)，探討其在LSCC組織中生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移與預(yù)后的關(guān)系。 材料與方法 收集2003年1月～2004年12月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科存檔的手術(shù)切除并經(jīng)病理確診的喉鱗狀細(xì)胞癌57例，其中男56例，女1例，年齡46歲～75歲(平均年齡61.5歲)，中位年齡58.2歲，所有病例術(shù)前均未接受過(guò)腫瘤治療。另取20例聲帶息肉及喉正常粘膜組織，來(lái)自2004年至2005年鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院耳鼻

5、喉科非癌患者喉正常粘膜。臨床分期及組織病理學(xué)分級(jí)按1992年國(guó)際抗癌協(xié)會(huì)(UICC)TNM分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)及組織病理學(xué)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)第四版第二次修訂方案：I期18例，Ⅱ期8例，m期24例，Ⅳ期7例；組織病理學(xué)分級(jí)：G<,1>(高分化)33例，G<,2>(中分化)20例，G<,3>(低分化)4例。應(yīng)用免疫組化SP法，正常喉粘膜及聲帶息肉組織作為對(duì)照組，已知陽(yáng)性組織作為陽(yáng)性對(duì)照(試劑公司提供)，PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，分別檢測(cè)nm23-H<,1>、b

6、FGF在標(biāo)本中的表達(dá)情況，利用CD34對(duì)微血管染色，計(jì)算MVD值，并結(jié)合LSCC的臨床病理特征進(jìn)行分析。采用SPSSl3.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以α=0.05作為差異有顯著性的檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1.nm23-H<,1>在聲帶息肉及正常喉粘膜組織中不表達(dá)。高分化LSCC中nm23-H<,1>蛋白表達(dá)陽(yáng)性率(69.7％)明顯高于中、低分化LSCC中nm23-H<,1>蛋白表達(dá)陽(yáng)性率(25.0％)

7、，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.05)；無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組nm23-H1蛋白表達(dá)(71.4％)明顯高于頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(18.2％)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；nm23-H<,1>蛋白表達(dá)與臨床分期無(wú)關(guān)(P>50.05)。 2.bFGF蛋白表達(dá)和病理分級(jí)和臨床分期均無(wú)關(guān)(P>0.05)；頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組bFGF蛋白表達(dá)(81.8％)明顯高于無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(45.7％)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3.病理分級(jí)不同

8、的LSCC中MVD值無(wú)顯著性差異，中晚期LSCC(Ⅲ+Ⅳ期)的MVD值(24.87±7.72)明顯高較早期(Ⅰ+Ⅱ期)的MVD值(18.94±6.59)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。有頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的MVD值(30.60±5.38)明顯高于無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的MVD值(16.86±2.51)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4.nm23-H<,1>蛋白表達(dá)陽(yáng)性者M(jìn)VD值明顯低于陰性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)

9、；bFGF蛋白表達(dá)陽(yáng)性者M(jìn)VD值明顯高于陰性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。LSCC中bFGF陽(yáng)性病例中，nm23-H<,1>的陽(yáng)性率(38.2％)低于nm23-H<,1>陰性的病例(69.6％)，兩者呈負(fù)相關(guān)(r<,s>=-0.478，P(0.05)。 結(jié)論 1.nm23-H<,1>蛋白的表達(dá)與有無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理分級(jí)有明顯相關(guān)關(guān)系，提示nm23-H<,1>對(duì)LSCC的轉(zhuǎn)移起重要作用，且隨著細(xì)胞分化程度的降

10、低，其轉(zhuǎn)移潛力的增強(qiáng)。 2.bFGF蛋白與有無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)關(guān)系，提示bFGF通過(guò)刺激新生血管的生成促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。 3.LSCC中MVD值與TNM分期及頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示MVD值可作為評(píng)價(jià)LSCC預(yù)后的指標(biāo)之一。 4.nm23-H<,1>蛋白的表達(dá)與MVD有明顯相關(guān)性，nm23-H<,1>蛋白陰性表達(dá)組MVD值明顯高于nm23-H<,1>蛋白陽(yáng)性表達(dá)組，提示轉(zhuǎn)移能力強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞克隆中血管生成的作