中藥穿山龍干預(yù)哮喘豚鼠fas、bcl-2凋亡基因表達(dá)的實驗研究.pdf

1、目的：
　　通過觀察中藥穿山龍對哮喘豚鼠肺內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞（Eos）的影響，對其體內(nèi)炎性因子粒細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、腫瘤壞死因子(TNF-α)水平，以及對凋亡促進基因fas與凋亡抑制基因bcl-2 mRNA及其蛋白表達(dá)的影響，研究中藥穿山龍在拮抗哮喘氣道炎癥方面的作用，以探討其治療哮喘的可能機制。
　　方法：
　　采用經(jīng)典的卵白蛋白注射與霧化吸入致敏激發(fā)法建立哮喘豚鼠模型。將50只符合實驗標(biāo)準(zhǔn)的豚鼠隨機分為5

2、組，每組10只，即正常組、模型組、醋酸潑尼松組、穿山龍組及穿山龍+醋酸潑尼松組，鏡下觀察各組支氣管肺泡灌洗液（BALF）中Eos計數(shù)的變化及肺組織中Eos浸潤等病理表現(xiàn)；免疫組化染色法檢測Bcl-2蛋白的表達(dá)；用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗法（ELISA）測定豚鼠血清中GM-CSF、TNF-α細(xì)胞因子的含量；RT-PCR法測定豚鼠體內(nèi)的fas和bcl-2 mRNA水平。
　　結(jié)果：
　　穿山龍各治療組豚鼠BALF的Eos計數(shù)明

3、顯低于模型組；穿山龍各治療組豚鼠血清中細(xì)胞因子GM-CSF、TNF-α濃度明顯低于模型組,穿山龍各治療組豚鼠肺組織勻漿中bcl-2 mRNA濃度明顯低于模型組, fas mRNA濃度明顯高于模型組，穿山龍各治療組Eos Bcl-2陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯低于模型組，經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)處理，與模型組比較，有顯著性差異(P<0.01或P<0.05)；而穿山龍+醋酸潑尼松組與醋酸潑尼松組比較，上述結(jié)果均無顯著性差異(P>0.05)；穿山龍各治療組可改善或明

4、顯改善哮喘豚鼠氣道粘膜及粘膜下層的炎性細(xì)胞浸潤。
　　結(jié)論：
　　1.穿山龍可明顯減少哮喘豚鼠肺組織Eos浸潤，減輕哮喘氣道炎癥。
　　2.穿山龍可誘導(dǎo)促進凋亡基因fas及減少bcl-2mRNA的表達(dá)，減少嗜酸粒細(xì)胞的Bcl-2蛋白表達(dá)，促使Eos凋亡。
　　3.穿山龍可明顯減低細(xì)胞因子GM-CSF、TNF-α的含量，減輕哮喘氣道炎癥。
　　4.穿山龍可明顯增強醋酸潑尼松治療哮喘的作用，從而減少醋酸潑尼松的