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1、目的:觀察大鼠角膜新生血管(CNV)形成過(guò)程中環(huán)氧合酶-2(COX-2)的表達(dá)情況及與CNV的關(guān)系,探討COX-2抑制劑Celecoxib對(duì)CNV的抑制作用。
方法:(1)Sprayue Dawley (SD)大鼠角膜堿燒傷建立新生血管模型,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組I、II、Ⅲ組和對(duì)照組,分別結(jié)膜下注射不同濃度的Celecoxib溶液和生理鹽水。堿燒傷后1d、2d、4d、7d、14d采用帶眼前段照相機(jī)的裂隙燈顯微鏡照相并測(cè)量角膜新生
2、血管長(zhǎng)度,計(jì)算角膜新生血管面積。(2)利用免疫組織化學(xué)方法、RT-PCR法檢測(cè)堿燒傷后各個(gè)時(shí)期COX-2和VEGF蛋白、mRNA在角膜各層中的分布,并對(duì)其進(jìn)行半定量。(3)比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各個(gè)時(shí)期COX-2和VEGF蛋白和mRNA表達(dá)量的差別,并對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,了解COX-2與VEGF的相關(guān)性。
結(jié)果:(1)堿燒傷2d,角膜新生血管芽開始形成,4d出現(xiàn)成熟的新生血管腔?;罨腃OX-2、VEGF蛋白和mRNA的表達(dá)在
3、角膜新生血管的形成中均有一動(dòng)態(tài)變化,即堿燒傷24h開始增加、4d時(shí)達(dá)到高峰、7d開始回落,14d時(shí)仍可見到陽(yáng)性表達(dá)。(2)COX-2表達(dá)部位主要在大鼠角膜損傷上皮以及隨后修復(fù)的上皮層、基質(zhì)層中浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞和新生血管內(nèi)皮細(xì)胞,VEGF的表達(dá)區(qū)域和COX-2的表達(dá)部位一致。(3)實(shí)驗(yàn)II組和實(shí)驗(yàn)Ⅲ組COX-2和VEGF 蛋白、mRNA表達(dá)量與對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),實(shí)驗(yàn)I組與對(duì)照組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)
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