重癥乙型肝炎HBV DNA CP區(qū)及前S區(qū)基因變異與河南地區(qū)HBV DNA基因型的研究.pdf

1、目的:該文分兩部分①以HBV DNA C基因啟動(dòng)子(CP)區(qū)及前S區(qū)為研究對(duì)象,研究重癥乙型肝炎患者HBV DNA發(fā)生基因變異時(shí)有無(wú)位點(diǎn)特異性,探索HBV基因變異在重癥乙型肝炎發(fā)病中所起的作用②應(yīng)用巢式PCR技術(shù),研究河南地區(qū)重癥乙型肝炎和慢性乙型肝炎患者中HBV DNA基因型及各型比例,不同基因型與乙型肝炎重癥化的相關(guān)性,進(jìn)一步分析HBV DNA基因型、HBV基因變異與乙型肝炎重癥化之間的相互關(guān)系.方法:(1)自16例重癥乙型肝炎患者

2、的血清提取HBV DNA,聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物聚丙烯酰胺凝膠電泳.隨機(jī)選取可能存在變異的3份PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,提純后核苷酸序列測(cè)定,計(jì)算機(jī)軟件分析基因序列的同源性、分析由基因序列推測(cè)的氨基酸序列的同源性.(2)自同一批16例重癥乙型肝炎患者及50例慢性乙型肝炎患者血清提取HBVDNA,應(yīng)用特異性引物,巢式PCR擴(kuò)增目的片段,瓊脂糖電泳,分析不同組乙型肝炎患者的HBV DNA基因型.結(jié)論:(1)基因變異在重癥乙型肝炎患者的

3、HBV DNA的前S區(qū)隨機(jī)出現(xiàn),主要集中在前S<,1>區(qū)下半段、前S<,2>區(qū),但不具位點(diǎn)特異性和聚集性突變,而HBV DNA CP區(qū)未發(fā)現(xiàn)明顯缺失突變,但在HBV DNA其他區(qū)域是否存在特征性變異不詳.(2)河南地區(qū)重癥乙型肝炎患者HBV DNA以B基因型為主,而慢性乙型肝炎患者以B、C混合型為主,HBV DNA B基因型和重癥乙型肝炎關(guān)系密切.(3)重癥乙型肝炎患者所感染B基因型的HBV基因中,CP區(qū)和前S區(qū)基因變異無(wú)位點(diǎn)特異性和聚