慢性乙型肝炎患者唾液中HBV DNA定量檢測研究.pdf

1、乙型肝炎是世界性分布的傳染病，我國是乙肝的高發(fā)區(qū)之一。乙型肝炎傳播的主要危險因素有血液及其制品、靜脈用藥、污染針頭注射、性傳播及母嬰垂直傳播等。但尚有相當(dāng)部分的HBV感染者無明顯危險因素暴露史，說明可能存在其他傳播途徑。據(jù)報道HBV攜帶者的唾液可能具有潛在的傳染性。國內(nèi)外有對乙肝患者唾液進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)志物和HBVDNA檢測的相關(guān)報道，在乙肝患者的唾液里檢測出了HBsAg，HBeAg，HBVDNA，但相關(guān)報道的例數(shù)較少，其臨床意義尚無結(jié)論。

2、病毒DNA是乙型肝炎病毒(HBV)復(fù)制和傳染的重要標(biāo)志。本實驗的目的是建立定量檢測慢性乙型肝炎患者唾液中HBVDNA的方法，并對60慢性乙型肝炎患者唾液中的HBVDNA含量進(jìn)行檢測，研究HBVDNA在唾液中的分布狀況及含量，以及與血清HBVDNA之間的關(guān)系，觀察不同口腔衛(wèi)生指標(biāo)對唾液HBVDNA狀況的影響，探討唾液在該病傳播流行中的意義。 材料和方法：檢測對象為我院2005年慢性乙型肝炎住院患者60例，均未接受過抗病毒治療。我們

3、對檢測對象進(jìn)行了口腔檢查包括：菌斑指數(shù)(PI)、牙齦指數(shù)(GI)、探針深度(PD)。檢測對象均無口腔粘膜病和口腔粘膜破損。唾液和血液均為同時收集，即刻檢驗。唾液的取樣：自然留取清亮唾液1ml，取500ul定量檢測，采用Trizol方法裂解唾液中DNA，氯仿-異丙醇方法進(jìn)行分離和提取，并對唾液進(jìn)行了隱血檢測。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測HBV血清學(xué)標(biāo)志物，用熒光定量聚合酶反應(yīng)PCR法檢測HBVDNA，對慢性HBV感染者唾液和血液標(biāo)

4、本進(jìn)行檢測分析。 結(jié)果：1、60例慢性HBV感染者中唾液HBVDNA陽性34例，陽性率為56.7％，陽性者平均HBVDNA含量為4.16±0.57(拷貝數(shù)/m1的對數(shù))；血液中HBVDNA陽性54例，陽性率為90％，陽性者平均HBVDNA含量為6.19±1.17(拷貝數(shù)/m1的對數(shù))。60例慢性HBV感染者的唾液HBVDNA陽性率和含量均顯著低于血液(x2=17.045，p=0.000＜0.05；t=9.399，p=0.000＜

5、0.05)。54例血液HBVDNA陽性者中唾液HBVDNA陽性例數(shù)為34例，陽性率為63％，血液HBVDNA陰性患者中唾液HBVDNA全部陰性。34例唾液HBVDNA和血液中HBVDNA同時陽性者，唾液和血液平均HBVDNA含量分別是4.16±0.57(拷貝數(shù)/ml的對數(shù))和6.24±1.11(拷貝數(shù)/m1的對數(shù))，前者顯著低于后者(t=9.65，p=0.000＜0.05)。同時唾液HBVDNA含量和血液HBVDNA含量不相關(guān)(r=0.

6、047，p=0.793＞0.05)。 2、在35例血清學(xué)檢查大三陽(HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性)患者中，血清HBVDNA全部陽性(100％)，陽性者平均HBVDNA含量為6.48±1.05(拷貝數(shù)/ml的對數(shù))；唾液HBVDNA陽性22例(62.9％)，平均HBVDNA含量為4.22±0.64(拷貝數(shù)/ml的對數(shù))。17例血清學(xué)檢查小三陽(HBsAg、抗-HBeAg、抗-HBc陽性)患者中，血清HBVDNA陽性12例

7、(70.6％)，平均HBVDNA含量為6.01±1.24(拷貝數(shù)/ml的對數(shù))；唾液HBVDNA陽性9例(52.9％)，陽性者平均HBVDNA含量為4.16±0.45(拷貝數(shù)/ml的對數(shù))。8例血清學(xué)檢查二陽(HBsAg、抗-HBc陽性)患者中，血清HBVDNA陽性7例(87.5％)，平均HBVDNA含量為5.01±1.04(拷貝數(shù)/ml的對數(shù))；唾液HBVDNA陽性3例(37.5％)，陽性者平均HBVDNA含量為4.06±0.71(拷

8、貝數(shù)/ml的對數(shù))。血清(x2=11.062p＜0.05)；唾液(x2=1.725p＞0.05)。 3、口腔PI，GI，PD指數(shù)對唾液HBVDNA的陽性率和含量沒有影響。唾液隱血檢測結(jié)果顯示，對唾液中無出血的乙肝患者，其唾液中的HBVDNA濃度與有明顯出血的患者水平相近。 結(jié)論：(1)、半數(shù)以上的乙型肝炎患者唾液中可檢出HBVDNA，其平均含量達(dá)到4.16±0.57(病毒拷貝數(shù)的對數(shù)值)，唾液傳播可能在HBV的流行中具有