慢性重型乙型肝炎患者HBV BCP-前C區(qū)基因變異及Th1-Th2免疫狀態(tài)的研究.pdf

1、目的： 研究慢性重型乙型肝炎患者HBVBCP/前C區(qū)基因變異和機(jī)體Th1/Th2免疫狀態(tài)，探討HBVBCP/前C區(qū)基因變異與重型肝炎發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系及發(fā)病機(jī)制。 方法： 1.對(duì)38例慢性重型乙型肝炎和40例慢性乙型肝炎患者進(jìn)行橫斷面研究。應(yīng)用PCR法對(duì)患者血清標(biāo)本進(jìn)行HBVBCP/前C區(qū)核苷酸序列擴(kuò)增及測(cè)序分析；同時(shí)采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)患者及20例健康獻(xiàn)血員血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-1

2、0水平。 2.對(duì)6例從慢性肝炎發(fā)展至重型肝炎的隨訪者進(jìn)行前后對(duì)照研究。應(yīng)用PCR法對(duì)患者在慢性肝炎及重型肝炎二個(gè)時(shí)期的血清標(biāo)本進(jìn)行HBVBCP/前C區(qū)核苷酸序列擴(kuò)增并測(cè)序分析；同時(shí)應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)患者血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的水平。 3.對(duì)1例肝移植患者在慢性肝炎、重型肝炎發(fā)生前、重型肝炎共三個(gè)時(shí)期的3份血清標(biāo)本和肝移植時(shí)患者的肝組織標(biāo)本進(jìn)行HBVBCP/前C區(qū)的核苷酸序列PCR擴(kuò)增，

3、T克隆及測(cè)序分析；同時(shí)采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平，并對(duì)肝組織進(jìn)行病理學(xué)、組織化學(xué)檢測(cè)。 結(jié)論： 1.HBVBCP/前C區(qū)變異與慢性重型乙型肝炎有一定的相關(guān)性，其中以BCP區(qū)A1762T/G1764A雙突變相關(guān)性較大。慢性HBV感染者在發(fā)生HBVBCP/前C區(qū)變異后有可能導(dǎo)致病情加重或重型肝炎發(fā)生，但兩者之間的因果關(guān)系尚需進(jìn)一步證實(shí)。 2.慢性重型乙型肝炎存在一

4、定程度Th1/Th2失平衡，以Th1型細(xì)胞因子占優(yōu)勢(shì)；HBVBCP/前C區(qū)變異可能通過影響HBeAg的合成和分泌，導(dǎo)致機(jī)體對(duì)HBV免疫狀態(tài)改變，Th1型細(xì)胞因子增高，進(jìn)而增強(qiáng)對(duì)肝細(xì)胞的損傷作用。 本研究的意義： 重型肝炎病情兇險(xiǎn)，死亡率高，發(fā)病機(jī)理尚未闡明。本研究通過對(duì)慢性重型乙型肝炎患者HBVBCP/前C區(qū)基因變異狀況以及患者體內(nèi)主要的Th1/Th2細(xì)胞因子水平進(jìn)行橫斷面和縱向前后對(duì)照研究，更充分的證實(shí)了HBVBCP/