SCID同源導(dǎo)入近交系615-SCID小鼠的培育及其生物學(xué)特性與初步應(yīng)用的研究.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文SCID同源導(dǎo)入近交系615SCID小鼠的培育及其生物學(xué)特性與初步應(yīng)用的研究姓名：朱惠芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：楊純正20031101中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文株，在我國(guó)應(yīng)用廣泛。SCID小鼠為1983年Bosma等發(fā)現(xiàn)的TB淋巴細(xì)胞聯(lián)合缺乏小鼠，適合建立人源性腫瘤動(dòng)物模型，但它的繁殖力低，滲漏率高，因而穩(wěn)定性不強(qiáng)。本研究目的是將位于SCID小鼠16號(hào)常染色體上的一對(duì)隱性免疫缺

2、陷等位基因?qū)氲?15小鼠，以建立我國(guó)自己的615小鼠T、B細(xì)胞聯(lián)合免疫缺陷動(dòng)物——615SCID同源導(dǎo)入近交系小鼠。該動(dòng)物品系將成為遺傳背景清楚，便于管理，繁育力強(qiáng)，生物學(xué)特性穩(wěn)定的新品系。關(guān)于將裸基因?qū)虢幌档膱?bào)道很多，但關(guān)于scid基因?qū)氩煌z傳背景小鼠的工作則較少。我們把SCID小鼠和615小鼠的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合在一起，可構(gòu)建更理想的白血病模型，用于白血病及人免疫性疾病等發(fā)病原因、發(fā)病機(jī)理、治療和藥物篩選研究，這一嘗試在國(guó)內(nèi)外還是首

3、例。本文在建立T、B淋巴細(xì)胞聯(lián)合免疫缺陷型615一SCID小鼠新品系的基礎(chǔ)上，對(duì)其生物學(xué)特性作了初步認(rèn)識(shí)。利用該品系成功建立了L615小鼠白血病模型、K562和HL60人白血病小鼠體內(nèi)模型和A549人肺癌細(xì)胞小鼠體內(nèi)模型。實(shí)驗(yàn)表明，615SCID小鼠具有615小鼠的遺傳背景，同時(shí)表現(xiàn)SCID基因的表型。該小鼠毛色棕色，胸腺缺乏皮質(zhì)，僅有少量髓質(zhì)，脾臟無(wú)脾小節(jié)，僅紅髓造血正常，淋巴結(jié)僅為基質(zhì)細(xì)胞，外周血白細(xì)胞，3500／微升，缺乏淋巴細(xì)胞

4、，淋巴細(xì)胞比例≤30％，特別是T淋巴細(xì)胞比例顯著低于其親本的SCID小鼠。血清IgG含量≤O02mg／毫升，骨髓CFUGM形成能力與其2個(gè)親代沒(méi)有差異；對(duì)放射性照射敏感，300cGy照射劑量可以導(dǎo)致骨髓衰竭。根據(jù)615SCID小鼠所表現(xiàn)的免疫缺陷特征和放射敏感特征，不難看出新品系動(dòng)物實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)后，可在國(guó)內(nèi)推廣用于環(huán)境致癌物的檢測(cè)，人類(lèi)造血機(jī)理的研究，免疫功能的研究，人類(lèi)單克隆抗體的生產(chǎn)，人白血病與實(shí)體瘤模型建立，造血干細(xì)胞與外周血細(xì)

5、胞等人鼠模型的建立，抗腫瘤藥物的篩選以及其它感染性疾病的研究等。還可用于疫苗生產(chǎn)時(shí)傳代細(xì)胞，及作為人類(lèi)基因治療的模型。615SCID小鼠的育成，為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)免疫雙缺陷動(dòng)物品系的生物學(xué)特性，如染色體特征、滲漏特征、生理過(guò)程及使用價(jià)值等奠定了基礎(chǔ)。也為發(fā)揮該品系動(dòng)物免疫缺陷和易發(fā)白血病的雙重特性，用于造血與血管新生研究和血液病的發(fā)病機(jī)理、治療研究，特別是為基因治療打下基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：小鼠，615SCID，SCID，615，人肺腺癌細(xì)胞系，A5