鹽酸小檗堿、右旋檸檬烯對人胃癌細胞株MGC-803的體外聯(lián)合作用評價.pdf

1、目的：體外觀察鹽酸小檗堿(簡稱小檗堿)、右旋檸檬烯(簡稱檸檬烯)單獨與聯(lián)合對人胃癌細胞株MGC-803抗癌效應，并探討可能的機制。 方法：小檗堿和檸檬烯單獨與聯(lián)合作用MGC-803細胞24至48 h。采用MTT法檢測藥物對胃癌細胞生長的抑制作用，利用Chou和Talalay法計算兩種藥物的合用指數(shù)(CI)以及藥物減少指數(shù)(DRI)；流式細胞術(shù)和激光共聚焦顯微鏡用于檢測其對細胞周期的分布、凋亡率、胞內(nèi)活性氧自由基的生成、線粒體膜電

2、位，以及Bcl-2、Caspase-3表達等的影響。 結(jié)果： 1.小檗堿與檸檬烯對MGC-803細胞的生長均有顯著的抑制作用，并且呈劑量-效應關(guān)系。兩藥以48h作用的中效劑量之比即1:4進行聯(lián)合，當合用劑量為0.1~1 mM作用24 h以及合用劑量為0.04~0.1 mM作用48h時，CI<1，小檗堿的DRl為1.8~3.8，檸檬烯的DRI為2.1～5.4，藥物聯(lián)合具有協(xié)同作用。 2.小檗堿使MGC-803細胞阻

3、滯于Go/G1期，檸檬烯單用與聯(lián)合則導致細胞周期阻滯于Go/G1期或(和)G2/M期。聯(lián)合藥物作用36h和48h的細胞凋亡率分別達到26％和29％，相同時間兩種藥物單獨使用時的凋亡率相比差異明顯(p<0.05)，作用24h時與檸檬烯單獨作用相比差異并不顯著。 3.小檗堿與檸檬烯單獨或聯(lián)合均能刺激MGC-803細胞內(nèi)活性氧ROS的生成，線粒體膜電位△Ψm降低，下調(diào)Bcl-2的表達，上調(diào)Caspase-3的表達，且藥物聯(lián)合與單獨用藥

4、時相比對MGC-803細胞作用更加顯著。 結(jié)論： 1.小檗堿與檸檬烯單獨或聯(lián)合對MGC-803細胞均有抑制作用。在一定劑量范圍內(nèi)，兩藥合用具有協(xié)同作用。 2.小檗堿與檸檬烯聯(lián)合對抗MGC-803細胞時，檸檬烯也許對細胞周期的影響起主要作用。兩藥的聯(lián)合能夠誘導細胞凋亡，但需要經(jīng)過一定時間的作用才能顯著提高細胞凋亡率。 3.兩藥的聯(lián)用可能通過刺激ROS的生成，使線粒體功能損傷以及調(diào)控凋亡蛋白的表達來誘導凋亡以