實驗性兔肺動脈栓塞中osteoglycin及PICP水平的變化及意義.pdf

1、目的：研究表明肺栓塞導致肺損傷，主要表現(xiàn)在肺血流異常，肺的微循環(huán)血管滲透性增加，肺血管阻力明顯增高，血管內皮細胞形態(tài)功能受損，通透性增加，肺含水量增加從而導致肺氧合功能障礙。但是有關肺栓塞對肺間質的影響甚少見報道。本研究通過HE、透射電鏡、Masson染色觀察肺形態(tài)學變化；酶聯(lián)免疫法測定肺組織勻漿中osteoglycin（OGN）和Ⅰ型前膠原羧基端肽（carboxyterminal propeptide of type I procol

2、lagen，P I CP）的含量表達變化，進一步探討肺栓塞過程中肺的間質性改變。
　　 方法：選取健康新西蘭大白兔48只，體重3.0～3.5kg，雌雄不拘。將Berman球囊漂浮導管的球囊置于左下肺動脈開口處，充盈球囊，堵塞左下肺動脈，建立兔肺動脈栓塞模型。隨機分為6組：（1）假手術組（n=8），（2）肺動脈栓塞1h組（n=8），（3）肺動脈栓塞4h組（n=8），（4）肺動脈栓塞8h組（n=8），（5）肺動脈栓塞12h組（n=8

3、），（6）肺動脈栓塞24h組（n=8），各組動物分別于相應時間點處死，取左下肺組織留取各種待測標本。通過HE、透射電鏡、Masson染色觀察肺組織及肺間質形態(tài)學變化；采用酶聯(lián)免疫法測定肺組織勻漿中osteoglycin、P I CP的含量變化。
　　 結果：（1）肺組織病理改變：光鏡下HE染色結果顯示：肺栓塞后肺組織呈現(xiàn)彌漫性病變，并且隨栓塞時間的延長病理改變逐漸加重；透射電鏡顯示肺栓塞后兔肺組織病理損害顯著，Ⅱ型肺泡上皮細胞表

4、面微絨毛數(shù)量顯著減少，嗜鋨性板層小體顯著減少，線粒體大部分嵴和少部分膜融合，模糊不清或缺失；肺栓塞12h時可見間質膠原纖維增生，24h時間質膠原纖維增生更明顯。（2）Masson染色結果：假手術組兔肺組織上皮細胞之間、血管周圍有少量膠原纖維；肺栓塞1h、4h、8h組與假手術組相似，膠原纖維的量和分布均無顯著變化。肺栓塞12h、24h組與假手術組相比較，膠原纖維在肺組織上皮細胞之間、血管周圍分布的量明顯增加。（3）肺組織勻漿中osteog

5、lycin（OGN）的含量變化：兔肺栓塞后，肺組織勻漿中OGN的蛋白水平逐漸下降。與假手術組比較，栓塞1h、4h、8h組OGN蛋白含量略下降，但無統(tǒng)計學意義（10.72±1.06，10.18±0.82，9.79±0.68，P>0.05）；栓塞12h、24h組OGN蛋白含量明顯下降，有統(tǒng)計學意義（9.09±0.43，8.21±0.57，P<0.05）。（4）肺組織勻漿中P I CP的含量變化：兔肺栓塞后，肺組織勻漿中P I CP的蛋白水平

6、逐漸增高。與假手術組相比較，栓塞1h、4h、8h組P I CP蛋白水平略增高，但無統(tǒng)計學意義（2.95±0.35，3.18±0.52，3.42±0.51，P>0.05.）；栓塞12h、24h組P I CP蛋白水平明顯增高，有統(tǒng)計學意義（3.86±0.25，4.28±0.32，P<0.05）。
　　 結論
　　 1.本實驗以新西蘭大白兔，通過介入方法使用Berman球囊漂浮導管成功制備肺栓塞動物模型，具有栓塞率高、可控制性

7、強、重復性好的優(yōu)點，是基礎研究的理想動物模型。
　　 2.光鏡下HE染色結果顯示：肺栓塞后肺組織呈現(xiàn)彌漫性病變，并且隨栓塞時間的延長病理改變逐漸加重；肺透射電鏡超微結構變化提示：肺栓塞中存在Ⅱ型肺泡上皮細胞和線粒體等肺實質損害，并且隨著栓塞時間的延長可見間質膠原明顯增生；Masson染色結果顯示：肺栓塞12h、24h組假手術組相比較，膠原纖維在肺組織上皮細胞之間、血管周圍分布的量明顯增加，提示存在有肺間質性改變。