實(shí)驗(yàn)性兔肺動(dòng)脈栓塞中osteoglycin及PICP水平的變化及意義.pdf

1、目的：研究表明肺栓塞導(dǎo)致肺損傷，主要表現(xiàn)在肺血流異常，肺的微循環(huán)血管滲透性增加，肺血管阻力明顯增高，血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)功能受損，通透性增加，肺含水量增加從而導(dǎo)致肺氧合功能障礙。但是有關(guān)肺栓塞對(duì)肺間質(zhì)的影響甚少見報(bào)道。本研究通過HE、透射電鏡、Masson染色觀察肺形態(tài)學(xué)變化；酶聯(lián)免疫法測(cè)定肺組織勻漿中osteoglycin（OGN）和Ⅰ型前膠原羧基端肽（carboxyterminal propeptide of type I procol

2、lagen，P I CP）的含量表達(dá)變化，進(jìn)一步探討肺栓塞過程中肺的間質(zhì)性改變。
　　 方法：選取健康新西蘭大白兔48只，體重3.0～3.5kg，雌雄不拘。將Berman球囊漂浮導(dǎo)管的球囊置于左下肺動(dòng)脈開口處，充盈球囊，堵塞左下肺動(dòng)脈，建立兔肺動(dòng)脈栓塞模型。隨機(jī)分為6組：（1）假手術(shù)組（n=8），（2）肺動(dòng)脈栓塞1h組（n=8），（3）肺動(dòng)脈栓塞4h組（n=8），（4）肺動(dòng)脈栓塞8h組（n=8），（5）肺動(dòng)脈栓塞12h組（n=8

3、），（6）肺動(dòng)脈栓塞24h組（n=8），各組動(dòng)物分別于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死，取左下肺組織留取各種待測(cè)標(biāo)本。通過HE、透射電鏡、Masson染色觀察肺組織及肺間質(zhì)形態(tài)學(xué)變化；采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定肺組織勻漿中osteoglycin、P I CP的含量變化。
　　 結(jié)果：（1）肺組織病理改變：光鏡下HE染色結(jié)果顯示：肺栓塞后肺組織呈現(xiàn)彌漫性病變，并且隨栓塞時(shí)間的延長(zhǎng)病理改變逐漸加重；透射電鏡顯示肺栓塞后兔肺組織病理?yè)p害顯著，Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表

4、面微絨毛數(shù)量顯著減少，嗜鋨性板層小體顯著減少，線粒體大部分嵴和少部分膜融合，模糊不清或缺失；肺栓塞12h時(shí)可見間質(zhì)膠原纖維增生，24h時(shí)間質(zhì)膠原纖維增生更明顯。（2）Masson染色結(jié)果：假手術(shù)組兔肺組織上皮細(xì)胞之間、血管周圍有少量膠原纖維；肺栓塞1h、4h、8h組與假手術(shù)組相似，膠原纖維的量和分布均無顯著變化。肺栓塞12h、24h組與假手術(shù)組相比較，膠原纖維在肺組織上皮細(xì)胞之間、血管周圍分布的量明顯增加。（3）肺組織勻漿中osteog

5、lycin（OGN）的含量變化：兔肺栓塞后，肺組織勻漿中OGN的蛋白水平逐漸下降。與假手術(shù)組比較，栓塞1h、4h、8h組OGN蛋白含量略下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（10.72±1.06，10.18±0.82，9.79±0.68，P>0.05）；栓塞12h、24h組OGN蛋白含量明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（9.09±0.43，8.21±0.57，P<0.05）。（4）肺組織勻漿中P I CP的含量變化：兔肺栓塞后，肺組織勻漿中P I CP的蛋白水平

6、逐漸增高。與假手術(shù)組相比較，栓塞1h、4h、8h組P I CP蛋白水平略增高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2.95±0.35，3.18±0.52，3.42±0.51，P>0.05.）；栓塞12h、24h組P I CP蛋白水平明顯增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（3.86±0.25，4.28±0.32，P<0.05）。
　　 結(jié)論
　　 1.本實(shí)驗(yàn)以新西蘭大白兔，通過介入方法使用Berman球囊漂浮導(dǎo)管成功制備肺栓塞動(dòng)物模型，具有栓塞率高、可控制性

7、強(qiáng)、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)，是基礎(chǔ)研究的理想動(dòng)物模型。
　　 2.光鏡下HE染色結(jié)果顯示：肺栓塞后肺組織呈現(xiàn)彌漫性病變，并且隨栓塞時(shí)間的延長(zhǎng)病理改變逐漸加重；肺透射電鏡超微結(jié)構(gòu)變化提示：肺栓塞中存在Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞和線粒體等肺實(shí)質(zhì)損害，并且隨著栓塞時(shí)間的延長(zhǎng)可見間質(zhì)膠原明顯增生；Masson染色結(jié)果顯示：肺栓塞12h、24h組假手術(shù)組相比較，膠原纖維在肺組織上皮細(xì)胞之間、血管周圍分布的量明顯增加，提示存在有肺間質(zhì)性改變。