肥胖大鼠脂肪組織基因表達(dá)譜特征的研究及差異表達(dá)基因功能的初步分析.pdf

1、目的:應(yīng)用cDNA微陣列(cDNA microarray)技術(shù),研究飲食性肥胖大鼠和NPY Y5受體反義基因治療后大鼠白色脂肪組織基因表達(dá)譜的變化,并對(duì)差異表達(dá)基因的功能進(jìn)行初步分析,以探討肥胖發(fā)生的機(jī)制.方法:提取脂肪組織mRNA,標(biāo)記cDNA探針,與含有18000個(gè)人類(lèi)基因片段點(diǎn)的cDNA微陣列(cDNA microarray)雜交,雜交膜信號(hào)掃描分析后,對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析.結(jié)論:肥胖大鼠治療前后的脂肪組織基因表達(dá)譜均

2、有其特殊的生物學(xué)特征;運(yùn)用聚類(lèi)分析,不僅能推測(cè)未知基因的功能,而且能推知已知基因的新功能.為發(fā)現(xiàn)新基因及已知基因的新功能提供了線(xiàn)索.目的:鑒定TSG-6基因在正常和肥胖兒童脂肪組織中的表達(dá),探討TSG-6基因在3T3-L1脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化中的作用以及TSG-6基因與肥胖發(fā)生、胰島素抵抗之間的關(guān)系.方法:(1)首先采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)正常和肥胖兒童皮下脂肪組織中TSG-6基因的表達(dá)水平,并測(cè)序鑒定.(2)采用細(xì)胞培養(yǎng)和RT-PCR技術(shù)

3、,在成功誘導(dǎo)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞分化成熟的基礎(chǔ)上,檢測(cè)誘導(dǎo)分化不同時(shí)段脂肪細(xì)胞中TSG-6基因的表達(dá)水平,并用TNF-α干預(yù)分化前脂肪細(xì)胞和成熟脂肪細(xì)胞,檢測(cè)TSG-6基因的表達(dá)水平.結(jié)果:(1)TSG-6基因表達(dá)于兒童的脂肪組織,且肥胖兒童皮下脂肪組織中TSG-6基因的表達(dá)水平顯著高于正常兒童.(2)隨著脂肪細(xì)胞逐漸分化成熟,TSG-6基因mRNA表達(dá)水平逐漸升高.(3)在分化前脂肪細(xì)胞和成熟脂肪細(xì)胞中,TNF-α均能在短時(shí)間內(nèi)明