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1、HPV16E6、E7基因?qū)儆诎┗?其編碼產(chǎn)物可誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化,并且在維持細(xì)胞的惡性表型中具有重要作用.由于E6、E7基因只在CINII-Ⅲ及宮頸癌細(xì)胞中持續(xù)表達(dá),因而是宮頸癌免疫治療的理想靶抗原,已成為HPV治療性疫苗研究的熱點(diǎn).為了提高E6/E7融合蛋白的表達(dá)水平并進(jìn)一步提高其免疫原性,我們對(duì)野生型HPV16E6/E7融合基因進(jìn)行了改造,構(gòu)建了HPV16 mE6△/mE7△和mE6△/mE7兩個(gè)融合基因,同時(shí)引入了3個(gè)點(diǎn)突變,并在
2、原核系統(tǒng)中進(jìn)行表達(dá).為了檢測(cè)HPV融合蛋白免疫原性,我們將純化的HPV16 mE6△/mE7△、mE6△mE7融合蛋白免疫C57BL/6小鼠,然后檢測(cè)其誘導(dǎo)的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng).實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該融合蛋白可以誘導(dǎo)出特異性的IgG抗體.其脾臟淋巴細(xì)胞體外經(jīng)E7蛋白刺激后能產(chǎn)生淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng).總結(jié):1.本工作用改造的HPV16E6/E7融合基因,實(shí)現(xiàn)了融合蛋白的高效表達(dá),約為菌體總蛋白的25~40%左右;2.證明了經(jīng)改造的融合蛋白疫苗有較好的
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