谷氨酰胺對(duì)大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:研究腹腔注射谷氨酰胺對(duì)大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷中Brn3a表達(dá)的影響。
　　 方法:健康清潔型Wistar大鼠55只隨機(jī)分為三組，正常對(duì)照組5只，實(shí)驗(yàn)對(duì)照組25只、實(shí)驗(yàn)組25只。正常對(duì)照組不做任何處理，實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組中所有大鼠玻璃體腔注射2μl80mmol/1 NMDA制作視網(wǎng)膜興奮性損傷模型，實(shí)驗(yàn)組在大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型制作7h后腹腔注射谷氨酰胺(0.75 g/kg)。實(shí)驗(yàn)組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組分別在造模后8h、12h、16

2、h、24h、48h各隨機(jī)處死5只大鼠，正常對(duì)照組大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)處死一只。HE染色光鏡下觀(guān)察各組視網(wǎng)膜組織的形態(tài)學(xué)變化，免疫組織化學(xué)染色及實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)視網(wǎng)膜Brn3a表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:HE染色顯示正常對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)層次清楚，染色均勻，細(xì)胞形態(tài)規(guī)則。實(shí)驗(yàn)各組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列紊亂，胞漿內(nèi)空泡樣變性，視網(wǎng)膜組織變薄，隨時(shí)間延長(zhǎng)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目逐漸減少。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)

3、各組Brn3a mRNA均較正常組減少;造模后12h、16h、24h、48h，實(shí)驗(yàn)組Brn3a mRNA均高于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;造模后8h，實(shí)驗(yàn)組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組Brn3a mRNA差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示Brn3a只在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)及光密度值測(cè)定結(jié)果與實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果相吻合。
　　 結(jié)論:1.成功建立大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型;
　　 2.NMDA可致大鼠視網(wǎng)膜中B