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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
建立離體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型(Langendorff),研究PPAR-γ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
方法:
將40只健康雄性SD大鼠,體重250-300g,隨機(jī)分為4組(每組10只):對(duì)照組(C組)、羅格列酮1ug/L組(Ra組),羅格列酮3ug/L組(Rb組),GW96621ug/L組(G組)。建立大鼠離體心臟缺血再灌注Langendorff模型。除對(duì)照組使用改良K-
2、H心臟灌流液灌注30min外,其他組均為K-H液灌流15min后換對(duì)應(yīng)藥物濃度繼續(xù)灌注15min。隨后各組均為停灌30min,隨后復(fù)灌60min(均為改良K-H心臟灌流液),收集冠脈流出液。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用與德國(guó)AD公司生產(chǎn)的大鼠離體心臟灌注裝置相匹配的Lab-chart7.2版本軟件連續(xù)記錄大鼠血流動(dòng)力學(xué)(HR、SBP、LVEDP、+dp/dt、-dp/dt及冠脈流量)變化;應(yīng)用TUNEL法檢測(cè)各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡情況;HE染色后應(yīng)用光鏡觀
3、察各組左心室的心肌組織結(jié)構(gòu)改變;采用ELISA法檢測(cè)冠脈流出液中肌鈣蛋白酶(TnI);采用Westernblot法檢測(cè)心肌細(xì)胞內(nèi)的GLUT-4、a-AMPK的含量。
結(jié)果:
Ra組、Rb組的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)均較對(duì)照組好,而G組較對(duì)照組差;各組冠脈流出液的TnI的濃度大小為:G組>C組>Ra組>Rb組;TUNEL法染色結(jié)果示:與C組相比,Ra組、Rb組凋亡細(xì)胞指數(shù)下降,而G組增高,與HE染色示組織形態(tài)學(xué)結(jié)果一致,West
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