養(yǎng)殖刺參（Apostichopus japonicus）苗期細菌性疾病及其病原學初步研究.pdf

1、近年來，山東和遼寧半島的養(yǎng)殖刺參(Apostichopus／japorticus)不斷發(fā)生大規(guī)模的死亡，給刺參養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。由于參苗對疾病的抵抗力弱、防病措施不夠完善等原因，苗期疾病的發(fā)生率、傳染率、死亡率極高，疾病的發(fā)生給苗期生產(chǎn)帶來了極其不利的影響。為了盡快查清引起刺參發(fā)病的原因，進而找到防治疾病的方法和措施，筆者經(jīng)過兩年的時間(2004—2005年)對山東和遼寧兩省沿海地區(qū)養(yǎng)殖刺參的苗期病害進行了流行病學調(diào)查和病原學

2、研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，刺參幼體“爛胃病”和“化板癥”是目前養(yǎng)殖刺參苗期危害最為嚴重的兩種細菌性疾病。本文主要對“爛胃病”和“化板癥”這兩種疾病進行了病原學的研究。 參苗樣品收集于山東、遼寧等地的多家刺參育苗場。采集病樣的同時，測量有關(guān)水質(zhì)指標、總結(jié)發(fā)病癥狀和發(fā)生情況。爛胃病多發(fā)生于5～7月份的中耳和大耳幼體時期，死亡率高達70～90％。發(fā)病癥狀表現(xiàn)為：幼體胃壁增厚、粗糙，繼而從正常的充盈梨形逐步萎縮變小、變形，嚴重時整個胃壁發(fā)生糜爛和

3、體壁潰爛，最終導(dǎo)致苗體死亡。被感染幼體胃中觀察到有大量的短桿狀細菌，運動活躍?；疾∮左w的攝食能力明顯下降或不攝食，生長和發(fā)育遲緩，形態(tài)、大小不齊，從耳狀幼體到樽形幼體的變態(tài)率降低?！盎灏Y”在山東、遼寧及河北的沿海地區(qū)均有發(fā)現(xiàn)，且發(fā)病率有逐年升高之勢，患“化板癥”初期，幼體收縮變短，活力下降，隨著病情的加重逐漸失去附著能力，掉落池底，整個身體自溶解體，在發(fā)病池的池底往往可發(fā)現(xiàn)許多刺參骨片。調(diào)查發(fā)現(xiàn)高溫或幼體培育密度高時則更容易發(fā)病，嚴重

4、時每批幼體的死亡率常達100％。 從患病樣品中共分離了八株優(yōu)勢細菌。研究路線為：首先取患病的參苗制作水浸片，在顯微鏡下觀察組織病變和微生物的存在情況，組織病理學初步確認病原；然后使用TSB、TCBS固體培養(yǎng)基分別分離病灶部位的細菌病原，優(yōu)勢細菌經(jīng)分離純化后進行人工回接感染試驗，最后，對該致病細菌進行形態(tài)學觀察和分類鑒定，具體方法包括細菌革蘭氏染色、負染后電鏡觀察常規(guī)生理生化試驗、16S rRNA基因同源性分析等。 病原

5、菌的鑒定結(jié)果表明：苗期幼體“爛胃病”和“化板癥’致病菌均存在病原多樣性，弧菌是海參育苗期間的主要病原?！盃€胃病”的三株主要致病菌分別被鑒定為燦爛弧菌(Vibrio splendidus)，交替單胞菌屬(Alteromonas sD．)，假交替單胞菌(Pseudoalteromonas sp．)?！盎灏Y”的五株致病菌中被選擇鑒定的三株有兩株屬于弧菌屬(Vibrio sp．) ，另外一株是Vibrio lentus。 此外，本文