三種海水養(yǎng)殖魚類的主要細菌性疾病研究.pdf

1、牙鲆、大菱鲆及石鰈為我國北方工廠化養(yǎng)魚的主養(yǎng)魚類，但隨著工廠化養(yǎng)殖規(guī)模、養(yǎng)殖密度的不斷加大，以及缺乏規(guī)范的引種檢疫及在養(yǎng)殖過程中對疾病的有效控制，加之魚類所處的特定水生境更易于病原的播散等，使得某些病原細菌廣為擴散，由某些病原細菌所引起的魚類感染，常表現(xiàn)出較大的流行面積、較高的發(fā)病率和死亡率，給相應(yīng)水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)帶來了較大的經(jīng)濟損失。 2001～2004年間，對遼寧、河北及山東牙鲆、大菱鲆及石鰈養(yǎng)殖場所發(fā)生的疾病進行了發(fā)病情況、發(fā)

2、病特點及病理變化等檢驗、細菌分離與鑒定、血清型別檢定、病原學(xué)意義測定、藥物敏感性試驗及防治技術(shù)等方面比較系統(tǒng)的檢驗與研究。明確了相應(yīng)疾病的發(fā)病特征，系統(tǒng)了病原細菌的主要生物學(xué)性狀，明確了其種屬：闡明了病原細菌的致病作用，揭示了其感染特性；測定了病原細菌的血清型，并建立了在發(fā)病特點、病原分離與鑒定、免疫學(xué)檢驗等方面的檢驗技術(shù)，通過對所分離鑒定的病原細菌做藥物敏感性測定選擇出了可用于防治的敏感藥物，為對這些細菌性疾病及病原細菌的有效檢驗與防

3、治、進一步深入研究等提供了相應(yīng)的技術(shù)資料與方法。 本項研究先后對不同養(yǎng)殖場自然發(fā)病的11起牙鲆病例、4起大菱鲆病例及2起石鰈病例進行了檢驗，包括發(fā)病季節(jié)、易感魚齡、發(fā)病率及死亡率等方面的內(nèi)容，通過較詳細的調(diào)研與檢驗，明確了相應(yīng)的發(fā)病情況與病理變化特征等。取所檢病魚病變組織進行細菌檢驗，結(jié)果從病變組織中均鏡檢到了大量細菌。 通過對細菌分離培養(yǎng)與純培養(yǎng)、形態(tài)與菌落特征、電鏡下的菌體形態(tài)、理化特性等表觀分類學(xué)指征鑒定及代表菌株

4、DNA中G+C mo1[％]的測定；同時擇代表菌株進行了16SrRNA基因的分子鑒定，測定了16SrRNA基因序列、分析了相關(guān)細菌相應(yīng)序列的同源性、構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)生樹；以表型性狀鑒定結(jié)果，及細菌發(fā)育學(xué)分析的結(jié)果，進行分離菌的種屬判定。結(jié)果表明所檢病魚分別為遲鈍愛德華氏菌、魚腸道弧菌、鰻利斯頓氏菌及兩種新病原弧菌一秦皇島弧菌和牙鲆弧菌(秦皇島弧菌根據(jù)細菌分離地命名，牙鲆弧菌根據(jù)分離的宿主魚命名)、嗜水氣單胞菌、格氏乳球菌、殺鮭氣單胞菌的一個

5、新亞種一殺鮭氣單胞菌殺鰈亞種(根據(jù)分離的宿主魚一石鰈命名)以及瓊氏不動桿菌，共9種細菌所引起的細菌性疾病。 取所分離鑒定的各種細菌的代表菌株，分別制備成福爾馬林滅活的全菌(OK)抗原及經(jīng)熱處理(121℃作用1h)的菌體(0)抗原，經(jīng)分別強化免疫接種家兔制備相應(yīng)抗血清，對相應(yīng)細菌做對應(yīng)及交叉凝集試驗進行了血清型檢定，明確了特異及交叉的抗原血清型別及血清同源性。為明確所分離鑒定的細菌的病原學(xué)意義，分別選取各種不同細菌的代表菌株進行了

6、對健康牙鲆、大菱鲆及石鰈等的回歸感染試驗，均能引起被感染魚的發(fā)病死亡且復(fù)制出了同自然病例樣的敗血癥病變等，并從人工感染病例中檢驗發(fā)現(xiàn)及回收到了純一的原感染菌，明確了這些細菌的相應(yīng)病原學(xué)意義。 以相應(yīng)細菌抗血清進行與待檢菌株的免疫血清學(xué)的玻片凝集反應(yīng)、免疫熒光抗體反應(yīng)等方面的檢驗，結(jié)果在同種細菌間的熒光抗體檢驗顯示了特異熒光反應(yīng)，玻片凝集反應(yīng)中也同樣是出現(xiàn)了特異凝集。初步表明了這些方法用于對被檢菌檢驗的可行性。 經(jīng)對分離鑒