Ginsenoside Rg1對脊神經(jīng)損傷修復(fù)的促進作用及機制研究.pdf

1、研究背景:脊神經(jīng)損傷在脊柱外科非常常見。脊柱退行性疾病、外科手術(shù)操作及外傷等都可能對脊神經(jīng)造成壓迫、牽拉、挫傷等,造成不同程度的運動、感覺功能障礙,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。然而,脊神經(jīng)損傷修復(fù)相關(guān)治療的臨床效果尚不理想,脊神經(jīng)損傷仍然是臨床面臨的重大難題。脊神經(jīng)損傷屬于周圍神經(jīng)損傷的范疇。目前,中藥及其提取物的相關(guān)研究是周圍神經(jīng)損傷修復(fù)領(lǐng)域中的熱點之一。研究表明,自人參中提取的人參皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1, GRg1)

2、對中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷具有營養(yǎng)、保護及抑制神經(jīng)元凋亡等作用。據(jù)此推測,GRg1的神經(jīng)保護作用也有可能適用于周圍神經(jīng)系統(tǒng)。但是,目前GRg1的相關(guān)研究主要集中于腦保護方面,GRg1在周圍神經(jīng)損傷中的應(yīng)用及機制研究很少。我們認為,將GRg1應(yīng)用于周圍神經(jīng)損傷修復(fù),有望提高周圍神經(jīng)損傷再生修復(fù)的治療效果。研究目的:在大鼠周圍神經(jīng)損傷模型中研究GRg1對周圍神經(jīng)損傷的治療效果。同時,在離體條件下針對GRg1對外周神經(jīng)膠質(zhì)細胞(雪旺細胞:Schwan

3、ncells, SCs)損傷條件下各種生物學(xué)行為的調(diào)控作用進行深入探索,以進一步揭示GRg1促進周圍神經(jīng)損傷后再生修復(fù)的可能機制。
　　材料方法:1.制備SD大鼠坐骨神經(jīng)挫裂傷模型,以不同劑量GRg1進行治療(高/低劑量),同時設(shè)立甲鈷胺對照組和生理鹽水對照組,通過神經(jīng)形態(tài)計量學(xué)指標(biāo)、熒光金逆行標(biāo)記、神經(jīng)電生理檢測、動物行為學(xué)指標(biāo)(坐骨神經(jīng)指數(shù))以及靶器官形態(tài)學(xué)指標(biāo)等評價大鼠神經(jīng)再生修復(fù)、功能恢復(fù)及靶器官情況等。2.制備SCs氧化

4、損傷模型,給予GRg1,并設(shè)立甲鈷胺組、氧化損傷組和正常組作為對照。應(yīng)用分光光度計測定丙二醛(malondialdehyde, MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)等指標(biāo)以明確SCs脂質(zhì)氧化損傷的情況,應(yīng)用DAPI染色和MTT試驗明確受損SCs增殖的情況,應(yīng)用流式細胞儀明確受損SCs凋亡的情況,利用RT-PCR、Western blot及ELISA等技術(shù)明確受損SCs合成和分泌NGF、BDNF等

5、神經(jīng)營養(yǎng)因子的情況。
　　結(jié)果:1.高劑量GRg1組的神經(jīng)再生修復(fù)和功能恢復(fù)情況(神經(jīng)形態(tài)計量學(xué)指標(biāo)、熒光金逆行標(biāo)記、神經(jīng)電生理檢測)明顯優(yōu)于其它組,坐骨神經(jīng)指數(shù)和靶肌肉的形態(tài)等恢復(fù)良好,最為接近正常。2. GRg1組SCs的氧化損傷水平、細胞凋亡數(shù)量明顯低于其他組,而其細胞增殖、細胞活力以及NGF、BDNF等神經(jīng)營養(yǎng)因子的合成和分泌顯著高于其他組。
　　結(jié)論:GRg1可以有效促進周圍神經(jīng)損傷再生修復(fù)并加快神經(jīng)功能的恢復(fù)。同