中國(guó)北方漢族人群高血壓的中間表型及基因組掃描研究.pdf

1、高血壓是最常見的心血管病，也是冠心病、腦卒中、心功能不全、腎臟疾病等最主要的危險(xiǎn)因素。在我國(guó)高血壓的患病率逐年增高，已成為重要的公共衛(wèi)生問題。高血壓的病因復(fù)雜，年齡、性別、體重指數(shù)，鹽攝入量，精神緊張、生活方式都可以影響的血壓的變化，除了這些環(huán)境因素外，遺傳因素的影響在人群的血壓變異中可以占到30％-50％。但高血壓的遺傳變異是復(fù)雜的，除少數(shù)單基因變異導(dǎo)致的高血壓外，絕大多數(shù)都不符合孟德爾遺傳規(guī)律。 高血壓的遺傳學(xué)病因研究是當(dāng)前

2、醫(yī)學(xué)界的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。近一二十年來(lái)，許多與高血壓相關(guān)的候選基因不斷地被揭示出來(lái)，全基因組掃描的結(jié)果也揭示出許多高血壓的易感位點(diǎn)，然而大多數(shù)的研究都存在著人群或種族的差異，許多研究的結(jié)果不一致。到目前為止，還沒有任何一個(gè)基因被認(rèn)為肯定與高血壓相關(guān)，這一切都因?yàn)楦哐獕壕哂懈叨鹊倪z傳異質(zhì)性，遺傳遲滯性、易感基因外顯不全等而且還受到環(huán)境因素的影響。 在北京石景山區(qū)心血管病防治過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)高血壓的大家系，該家系結(jié)構(gòu)復(fù)雜，規(guī)模龐大，目前存

3、活有300多人。這樣的大家系能提供一個(gè)較為單一的遺傳背景，是高血壓遺傳學(xué)研究的良好的素材。對(duì)該家系進(jìn)行了充分的家系分析，從該家系成員血壓表型上看，沒有出現(xiàn)很早發(fā)病或出現(xiàn)十分嚴(yán)重的高血壓表現(xiàn)，同時(shí)不伴有其他畸形，不符合孟德爾遺傳規(guī)律。但從其家系結(jié)構(gòu)和規(guī)模上看，也不同于一般的高血壓核心家系，可能存在著主基因效應(yīng)。我們決定從高血壓的中間表型入手，對(duì)該家系進(jìn)行研究，如果能發(fā)現(xiàn)較明顯的中間表型的變化，則根據(jù)提示，采用候選基因克隆的策略，如果沒有明

4、顯的中間表型的變化，則采用全基因組掃描的策略，尋找與該家系可能的主基因連鎖的易感位點(diǎn)，然后在核心家系中進(jìn)行驗(yàn)證。 材料和方法：高血壓大家系入選：該家系系譜圖中共7代398人。去除已死亡和失訪者，參加本次調(diào)查的共233人，其中15歲以上為本次調(diào)查的入選者共198例，其中直系親屬126人，旁系親屬72人。高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：按1999年WHO高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：SBP≥140mmHg或DBP≥90mmHg或兩周內(nèi)服降壓藥者。高血壓核心家系：

5、在距離高血壓大家系居住地100公里的順義區(qū)農(nóng)村篩選50個(gè)高血壓核心家系。先證者入選標(biāo)準(zhǔn)：年齡＞15歲；父代至少1人患高血壓；子代中至少2人患高血壓；無(wú)繼發(fā)性高血壓的臨床癥狀和生化指征，排除急、慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、柯興氏綜合征或嗜鉻細(xì)胞瘤；無(wú)皮質(zhì)激素使用史(女性無(wú)雌激素使用史)；三次不同時(shí)間測(cè)量，靜息SBP≥140mmHg和/或DBP≥90mmHg或兩周內(nèi)服抗高血壓藥物者。所有家系經(jīng)初篩并確認(rèn)后開始正式調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容包括心血管疾病個(gè)

6、人與家族史及環(huán)境因素的標(biāo)準(zhǔn)化問卷、人體指標(biāo)、血壓測(cè)量和血糖、血脂等生化指標(biāo)測(cè)定。高血壓大家系成員放免法檢測(cè)血漿胰島素濃度、血漿血管緊張素原濃度，血漿腎素活性血漿血管緊張素Ⅱ濃度，血漿醛固酮濃度。在對(duì)高血壓大家系上述中間表型研究的基礎(chǔ)上，對(duì)高血壓大家系進(jìn)行了全基因組掃描(該工作作為中德科技合作項(xiàng)目由德國(guó)MDC完成)，得到兩個(gè)連鎖位點(diǎn)d9s1810，d12s1682，我們?cè)谶@兩個(gè)位點(diǎn)附近增加微衛(wèi)星標(biāo)記的密度，在核心家系中通過(guò)基因掃描技術(shù)進(jìn)行

7、驗(yàn)證。 結(jié)果：高血壓大家系中間表型研究：(1)將高血壓大家系成員分為直系親屬高血壓組(HD)，直系親屬正常血壓組(ND)，旁系親屬高血壓組(HN)和旁系親屬正常血壓組(NN)。 (2)各組間高甘油三酯血癥患病率沒有差別，高膽固醇血癥患病率有HN組高于ND組。各組之間血漿甘油三酯濃度，血漿膽固醇濃度和血漿高密度脂蛋白膽固醇濃度都沒有差別，經(jīng)年齡、性別、吸煙、飲酒等調(diào)整后，各組仍沒有差別。 (3)各組血糖濃度沒有差別

8、，血漿胰島素濃度HD組高于NN組和ND組，其余各組之間沒有差別。胰島素抵抗指數(shù)HD高于NN組，其余各組之間差別沒有顯著性。經(jīng)年齡、性別校正后，仍如此。 (4)在RAS系統(tǒng)，各組之間血漿血管緊張素原濃度、血漿血管緊張素Ⅱ濃度、血漿腎素活性和血漿醛固酮濃度沒有差別。經(jīng)年齡、性別校正后，這種趨勢(shì)沒有變化。 核心家系易感位點(diǎn)基因組掃描研究：(5)參數(shù)連鎖分析顯示：在假定的顯性或共顯性模式下，9號(hào)染色體11個(gè)位點(diǎn)以及12號(hào)染色體1

9、0個(gè)位點(diǎn)都沒有達(dá)到連鎖所需的強(qiáng)度。 (6)非參數(shù)連鎖分析：S.A.G.E4.2/LODPAL顯示兩個(gè)區(qū)域內(nèi)21個(gè)位點(diǎn)同高血壓之間都沒有連鎖關(guān)系。將血壓按SBP和DBP分成收縮期高血壓和舒張期高血壓后，分析顯示在d12s1654同收縮期高血壓之間LODscore=1.048。 S.A.G.E4.2/SIBPAL模塊分析顯示：meantest多點(diǎn)分析結(jié)果顯示在12號(hào)染色體d12s1591、d12s1654和d12s363三個(gè)

10、位點(diǎn)在不一致性同胞對(duì)(受累同胞和非受累同胞組成的同胞對(duì))共享等位基因的頻率與孟德爾分離分析期望值的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，P=0.0296、P=0.0096、P=0.014，其余各位點(diǎn)頻率的差別無(wú)顯著性。進(jìn)一步調(diào)整了同胞對(duì)間的年齡、性別和BMI之間的差異，分別以高血壓質(zhì)量性狀和SBP、DBP數(shù)量性狀進(jìn)行非參數(shù)回歸分析，結(jié)果顯示，包括d12s1591、d12s1654和d12s363三個(gè)位點(diǎn)在內(nèi)，12號(hào)染色體12p12.2區(qū)域內(nèi)的10個(gè)微衛(wèi)星

11、標(biāo)記位點(diǎn)及9號(hào)染色體各位點(diǎn)同高血壓和SBP、DBP之間都沒有連鎖關(guān)系。 (7)傳遞不平衡檢驗(yàn)：對(duì)d12s1591、d12s1654和d12s363進(jìn)行傳遞不平衡檢驗(yàn)，TDT檢驗(yàn)結(jié)果沒有發(fā)現(xiàn)三個(gè)位點(diǎn)與高血壓性狀有傳遞不平衡的證據(jù)。 結(jié)論：(1)脂代謝、糖代謝以及腎素—血管緊張素—醛固酮系統(tǒng)諸指標(biāo)都不是該高血壓大家系有效的中間表型。 (2)9號(hào)染色體9p24區(qū)域內(nèi)的11個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記位點(diǎn)同高血壓或SBP、DBP之間不存