黏蛋白家族MUC2基因甲基化的檢測及對胰腺癌的診斷研究.pdf

1、目的：評價MUC2基因甲基化對胰腺癌早期診斷意義，并建立一種可行的胰腺癌基因甲基化檢測方法。 方法：采用RT-PCR法檢測MUC2 mRNA的表達；免疫組化法檢測MUC2蛋白的表達情況；甲基化特異性PCR(MSP)+直接測序法檢測MUC2基因啟動子區(qū)發(fā)生甲基化的確切位點；采用甲基化限制性酶切(Msp Ⅰ/Hap Ⅱ)+PCR方法檢測胰腺癌患者外周血及糞便標本中MUC2甲基化情況。 結果發(fā)現(xiàn)：人胰腺癌細胞株ASPC、CFP

2、AC1、SW1990經去甲基化制劑5-Aza處理后MUC2重新表達；同樣此3種胰腺癌細胞株經MSP測序明確該基因啟動子區(qū)5'CpG島的甲基化位點；在外周血標本組中，40例胰腺癌標本中16例甲基化(40.0％)，15例慢性胰腺炎中未發(fā)現(xiàn)甲基化，25例正常對照中1例甲基化(4.0％)。30例胰腺癌患者糞便標本MUC2基因甲基化率為36.7％；8例慢性胰腺炎為0％；20例正常對照者甲基化率為5.0％。10例胰腺癌患者外周血及糞便標本聯(lián)合檢測，