棉花黃萎病菌脅迫條件下蛋白質(zhì)表達(dá)差異分析.pdf

1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文棉花黃萎病菌脅迫條件下蛋白質(zhì)表達(dá)差異分析姓名：王雪申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：馬峙英;張桂寅20060618D i f f e r e n t i a lE x p r e s s i o n A n a l y s i so f P r o t e i n sU n d e r p 垂，如刪“卅咖廳砌PS t r e s si nC o t t o nA u t h o r ：W a n g

2、X u eM a j o r ： c r o p G e n e t i c sa n d B r e e d i n gS u p e r v i s o r ：P r o fM a Z h i y i n gP m ￡Z h a n g G u j y i nA b s t r a c tV e r t i c i l l i u mw i l ti s aw o r l d w i d ed e s t r u c t i v e

3、p l a n td i s e a s e ，、n i c hi s r e c o g n i z e da s as e r i o u st h r e a tt oc o t t o np r O d u c t i o n ．I nt h i sr e s e a r c h ，t w o —d i m e n s i o n a le l e c t r o p h o r e s i sw a su s e dt os

4、t u d ym ed i f 挹r e n t i a le x p r e s s i o np r o t e i n su n d e r 艙r r f c f ，f f “ m 出向，f 口s t r e s si nc o t t o n ．T h e n M S 、v a s u s e d t os t u d y t h e d i f f b r e n t i a le x p r e s s i o n p r

5、o t e i n S ．T h i si sn o tO n l yp r o p “i o u st oe 1 1 r i c ht h eb i o c h e m i c a I t h e o r yo f t h e r e s i s t a n c eo fV 毫r t i c i I l i u mw i l ti nc o t t o n ，b u ta J s oc a l lg e t m e a n l i n

6、 o a c i ds e q u e n c e s o f t h er e s i s t a l l tp r o t e i n s ．T h i sc a n p r o V i d e g u i d a n c ei nt h eb r e e d i n go f r e s i s t a n tV a r i e t yb yg e n e t i c e n g i n e e r i n g ．T h e v

7、a r i e t yo f c o t t o nn a r n e dY U w u 6 2 0 w a s u s e di nt h i sr e s e a r c h ．Y U W u 6 2 0 i n o c u l a t e d礦d b 矗，f ⅡP ．As y s t e mo f2 一D Et h a t i s s u i t a b l ef o rc o t t o nw a se s t a b l i

8、s h e d ．T h e i m p r o v e dT C A - a c e t o n e 、v a su s e dt op r e p a r e p r o t e i n s 啪p l e ．I nt h i ss t e p ，t l l et i m eo f u s i n ga c e t o n et op r c c i p i t a t e p r o t e i n s w a s t l l r

9、e e ．T h r o u 曲t h i si m p r o v e m e n t ，p m t e i n s a m p l eh a dh i 曲e rc o n c e n t r a t i o na 1 1 dw a s p u r e ．I n I E F ’t h ef i n a lv 0 1 t a g er e a c h e d1 2 0 0 0 0 v tT h i sc a l l m a k e I

10、E Fg e t ag o o d r e s u l t ．T h et i m eo f e q u i l i b r a t i o n o f m eI P G g e ls t r i p sw a sm a d es u r e ，w h i c h 娜h e l p 向l f o ra v o i d i n g v e n i c a ls t r e a k s ．I t c o n t a i n e d t w

11、os t e p s ，m e t i m eo ff i r s t s t e p w a s2 0 m i n ，a n dt h e s e c o n dw a s 2 5 m i n ．T h e n 也e S D S —P A G Ew a sc a r r i e d O u tb yt h e g e l( T = 1 2 ％) u 1 1 d e r l o w e r a n ds t e a d y e l e

12、c t r i cc u r r e m ．P D Q u e s t 、v a su s e d t os t u d y t h e2 一D E m 印so f l e a v e sp r o t e i n s t h a tw e r ee x 訂a c t e df 幻mi n o c u l a t e dp l a n ta n dC K ．T h e r e s u l t ss h o w e d t h a tt

13、h e r ew e r em a n y d i f 免r e n c e s b e t w e e nt h ep r o t e i nm a p s t h a ti n o c u l a t e d a 1 1 dC K ．T 主l r e es p o t sa p p e a r e di nm e p r o t e i n m a p o f t 1 1 el e a v e si n o c u l a t e

14、d ，b u t w a s n o te x i s t e d i nC K ．S e n tt h e s e t h r e es p o t st os t u d y b yM A L D I ．T O F - M S ，Ⅱl e n w ep e r f o m e dd a t a b a s es e a r c hf o r t h e s et h r e ed i f r e r e m i a l e x p

15、r e s s e dp r o t e i n s ．T kr e s u l t s h o w s t h a t 也e s e p r o t e i n s s h o w e d s o m e s i m i l a r i t y 耐t l lk n o w np r o t e i n s i n t h ed a t a b a s e ．T h e y m a y h a v e f u n c t i o ni

16、nt l l er e s i s t 肌c e r e s p o n s e s t oV e r t i c i l l i u m 懈l t ．‘7( 1 ) T h e p r o t e i ns p o tD B l s h o w e ds o m es i m i l a r i t yw i mD E A D ／Hb o xR N A h e l i c a s e ．1 飛ep r o t e i n h a sa

17、 I l A T P b i n d i n gs i t e ．I tm 追h th a v e N B sd o m a i na 1 1 d h a v e i m p o r t a mf h c t i o ni ns i g n a l t r a n s d u c t i o np 砒w a y a 1 1 d t h ei m m u n er e g u l a t i n g o fh o s t ．nm a yh

18、 a v e 劬c t i o n i nt h e r e s i s t a l l c er e s p o n s e s t o 、，e r t i c i l l i u mw i l t ．( 2 ) T h ep m t e i ns p o tD B 2 p r o t e i ns h o w e d s o m e s i m i l a r i t yw i t hs e r i n ep r o t e i n