干旱脅迫條件下花生葉片蛋白質組學研究.pdf

1、植物在其生長過程中經常會遭受到不同程度的生物和非生物逆境脅迫，這些脅迫嚴重影響植物的生長發(fā)育，并對農業(yè)生產造成極大的負面影響?；ㄉ侵匾挠土献魑锖徒洕魑铩Ｎ覈鞘澜缟戏N植花生的主要國家之一，花生產區(qū)主要分布于干旱和半干旱地區(qū)。干旱嚴重影響花生的產量和品質，是花生生產的首要限制因子。我國有70％的花生面積受到不同程度的干旱危害，平均減產20％以上，造成巨大的經濟損失。因此，解決干旱對花生生產的影響是當務之急。
　　蛋白質組學可以

2、研究許多基因組水平上無法體現的層面，如:基因表達的翻譯水平、翻譯后的各種蛋白質修飾以及蛋白質的相互作用等。近年來，植物蛋白質組學的研究日益增多，主要集中在擬南芥、水稻等模式植物上，研究范圍包括在非生物因子的環(huán)境脅迫條件下的生理變化，如干旱、高鹽、缺氧、ABA處理和機械損傷等，生物因子如菌根真菌以及與植物共生關系的根瘤菌對植物生長的影響。還有植物組織器官如根、莖、葉、花、果實、種子發(fā)育過程中的蛋白質變化。此外植物蛋白質組學研究已經深入到亞

3、細胞水平，即研究在一個細胞器內表達的蛋白質組，這些細胞器包括葉綠體、線粒體、內膜系統(tǒng)等，而且還涉及植物群體遺傳方面，包括基因多樣性和表型多樣性之間的關系，基因突變引起的蛋白質表達變化，植物激素的信號傳導和作用機理等方面。
　　花生是重要的油料作物，具有很高的營養(yǎng)價值，為異源四倍體植物，基因組龐大(約2.8×109 bp)，其蛋白質組學的研究尚處于起步階段。
　　本研究以花生品種魯花14為實驗材料，PEG6000模擬干旱環(huán)境，

4、提取葉片可溶性蛋白進行雙向電泳分析。在三氯乙酸/丙酮沉淀法的基礎上，對樣品抽提、樣品溶解、膠條 pH范圍選擇、蛋白上樣量、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳等關鍵步驟進行改進，獲得了蛋白點較多、重復性好的雙向電泳圖譜?；ㄉ~片蛋白質雙向電泳選用pH4-7的IPG膠條，采用考馬斯亮藍染色法，在上樣量為280μg時，得到效果較佳的電泳圖譜。2-DE圖譜上蛋白點數量約480個，圖像清晰，蛋白點無明顯拖尾現象，這為開展花生葉片蛋白質組研究奠定了基礎。經