黃萎病菌脅迫下棉花抗病相關(guān)基因的差異表達(dá)研究.pdf

1、棉花黃萎病(Verticilliumwilt)是由黃萎病菌(Verticilliumdahliae)引起的維管束病害，在世界范圍內(nèi)廣泛流行，目前尚未得到有效控制，選育和利用抗病品種是一種經(jīng)濟(jì)、有效的防治黃萎病危害的措施。因此必須深入了解棉花抗黃萎病基因的表達(dá)規(guī)律及棉花黃萎病與寄主的相互作用機(jī)制，為利用基因工程手段培育抗黃萎病品種提供有力的理論依據(jù)。 本研究利用強(qiáng)致病力菌系誘導(dǎo)陸地棉抗黃萎病品種冀棉20號(hào)、陸地棉感黃萎病品種邯20

2、8和海島棉抗黃萎病品種Pima90-53應(yīng)激基因的表達(dá)，通過(guò)cDNA-AFLP技術(shù)篩選與抗病相關(guān)的差異條帶，以獲得與抗黃萎病相關(guān)的候選基因，從而為抗病育種提供新的基因來(lái)源。從256對(duì)引物中篩選出31對(duì)差異性較好的引物，利用31對(duì)引物共篩選了82條差異條帶，二次擴(kuò)增獲得55條擴(kuò)增條帶，從中選擇性克隆了15條進(jìn)行測(cè)序。將克隆序號(hào)命名為Vdrg(ResponseGeneinducedbyVerticilliumdahliae)。 對(duì)1

3、5條序列的初步分析如下：與棉花數(shù)據(jù)庫(kù)中的序列進(jìn)行同源性比較，發(fā)現(xiàn)本研究所得cDNA序列與棉花數(shù)據(jù)庫(kù)中的基因同源性均很低，由此推測(cè)該cDNA序列是在黃萎病菌誘導(dǎo)表達(dá)下的新序列。與基因組文庫(kù)中的序列進(jìn)行同源性分析，發(fā)現(xiàn)Vdrg10是一個(gè)337bp的基因片段，有318個(gè)堿基與推斷的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白具有99﹪(318/319)的同源性；Vdrg28是一個(gè)323bp的基因片段，有243個(gè)堿基與50s核糖體蛋白L3具有91﹪(243/266)的同源性；Vd