亞慢性砷暴露對小鼠腦組織Glu及NO代謝影響研究.pdf

1、前言: 飲水型砷中毒是我國主要的地方病之一，現(xiàn)已查明的高砷暴露人口達300萬，我國已成為世界上受砷中毒危害最嚴重的國家之一。近年來，砷對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的毒性作用引起了人們的廣泛關注。臨床研究、流行病學調(diào)查和動物實驗研究均顯示長期砷暴露可引起實驗對象的行為異常和智力障礙。 本研究通過建立亞慢性小鼠飲水砷中毒模型，觀察砷暴露對小鼠腦組織中谷氨酸(Glu)和一氧化氮(NO)關鍵代謝酶，谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酰胺酶(PAG)

2、以及一氧化氮合酶(NOS)活性的影響，為探討砷暴露對中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的機制提供實驗參考數(shù)據(jù)。 對象和方法: 1、實驗動物與染毒雌性健康昆明種小鼠32只，體重15.0±1.0 g。適應性喂養(yǎng)1周后，將小鼠按體重隨機分為4組，25、50和100mg/L染砷組及對照組，每組各8只小鼠。染毒期間各實驗組小鼠自由飲用含砷水，對照組小鼠飲蒸餾水，染毒時間為42天。染毒結束后，乙醚麻醉小鼠，快速取血和腦組織，-40℃冰箱冷凍保存。

3、 2、檢測指標與方法 (1)腦及血中不同砷形態(tài)測定：氫化物發(fā)生-冷原子捕獲-原子吸收分光光度法。 (2)谷氨酰胺合成酶活性測定：γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的非生理學催化反應。 (3)磷酸激活的谷氨酰胺酶活性測定：Curthoys和Lowry方法測定。 (4)谷氨酸含量測定：采用南京建成試劑盒測定。 (5)一氧化氮合酶活性測定：采用南京建成試劑盒測定。 (6)一氧化氮含量測定：采用南京建成試劑盒測

4、定。 (7)組織蛋白含量測定：雙縮脲法。 3、統(tǒng)計分析 檢測數(shù)據(jù)輸入計算機，用SPSS 13.0進行數(shù)據(jù)分析與處理。血和腦中各砷形態(tài)含量不呈正態(tài)分布，采用秩和檢驗(Kruskal-Wallis test)，組間比較采用秩次代替原變量進行ANOVA及SNK參數(shù)分析。其它指標的統(tǒng)計分析采用ANOVA及SNK的參數(shù)分析。 結果: 小鼠血和腦中iAs、MMA和DMA含量均隨染砷劑量的增加而升高。各染砷組小

5、鼠腦中GS和PAG活性及Glu含量與對照組比較均升高，50mg/L染砷組GS活性、25mg/L和50mg/L染砷組PAG活性及100mg/L染砷組Glu含量與對照組比較有統(tǒng)計學意義。100mg/L染砷組PAG活性與25mg/L染砷組比較有統(tǒng)計學意義。100mg/L染砷組小鼠腦中NO含量與對照組、25和50mg/L染砷組比較均有統(tǒng)計學意義。各染砷組小鼠腦中tNOS活性與對照組比較均有統(tǒng)計學意義，且100mg/L染砷組小鼠腦中tNOS活性與

6、50mg/L染砷組比較也有統(tǒng)計學意義。各染砷組iNOS活性與對照組比較均有統(tǒng)計學意義。100mg/L染砷組小鼠腦中cNOS活性與對照組和50mg/L染砷組比較也有統(tǒng)計學意義。 結論: 1、在較高砷暴露水平下，無機砷及其甲基代謝產(chǎn)物均可以透過成鼠的血腦屏障進入腦組織；與iAs相比，DMA更容易進入腦組織并蓄積。 2、亞慢性砷暴露可能通過提高GS和PAG活性，干擾Glu的正常代謝，進而對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的各種功能，包括學