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1、目的:探討砷誘導(dǎo)小鼠海馬神經(jīng)元凋亡與Bcl-2和Bax表達(dá)之間的關(guān)聯(lián)性,為闡明砷的神經(jīng)毒作用機(jī)制以及預(yù)防神經(jīng)毒性危害提供依據(jù)。
方法:SPF級(jí)小鼠40只,雌雄各半,按體重將小鼠隨機(jī)分為4組,分別為對(duì)照組、1ppmAs2O3染毒組、2ppmAs2O3染毒組、4ppmAs2O3染毒組。通過(guò)自然飲用含不同濃度As2O3蒸餾水的方式使小鼠染毒,連續(xù)染毒60天后取出海馬組織。用TUNEL染色法和電鏡技術(shù)檢測(cè)染砷小鼠海馬神經(jīng)元的凋亡情
2、況,用Real-timePCR,Westernblot技術(shù)檢測(cè)Bcl-2和Bax的基因、蛋白表達(dá)。采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件,用單因素方差分析(ANOVA),比較各染砷組與對(duì)照組間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,兩組間比較用LSD法分析,以P<0.05表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。
結(jié)果:TUNEL凋亡染色結(jié)果顯示,對(duì)照組小鼠海馬組織CA1區(qū)未見(jiàn)陽(yáng)性染色細(xì)胞,而染砷組小鼠海馬組織CA1區(qū)可見(jiàn)陽(yáng)性染色細(xì)胞,且隨著染砷劑量的增加其陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)也增加,
3、尤其2ppm染砷組4ppm染砷組小鼠海馬組織陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量顯著多于對(duì)照組。電鏡檢測(cè)結(jié)果顯示,染砷組小鼠海馬組織在視野中可見(jiàn)較多數(shù)量的凋亡細(xì)胞,細(xì)胞皺縮,染色質(zhì)凝聚分布于核周,與TUNEL凋亡染色結(jié)果基本一致。RealTimePCR定量檢測(cè)結(jié)果顯示,染砷組小鼠海馬組織中Bcl-2基因表達(dá)顯著低于對(duì)照組,而B(niǎo)ax基因表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。Westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示,染砷組的小鼠海馬組織中Bcl-2基因表達(dá)顯著低于對(duì)照組,
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