小鼠多巴胺能神經元慢性損傷過程中凋亡相關蛋白BCL-2與BAD的表達.pdf

1、目的:帕金森氏病(Parkinson's disease,PD)是一種嚴重危害人類健康的中樞神經退行性疾病,現(xiàn)已證實PD的主要病理變化為患者中腦黑質致密部多巴胺(dopamine,DA)能神經元的進行性變性死亡,從而導致黑質紋狀體系統(tǒng)DA的產量減少,紋狀體DA供應不足。如何闡明或阻止DA能神經元的變性死亡,仍是當前PD治療研究的熱點之一。因此,積極探索DA能神經元的保護措施及其機制,有著極其重要的醫(yī)學價值和社會意義。本研究的主要目的是觀

2、察在MPTP慢性損傷小鼠DA能神經元的過程中,小鼠行為學變化,凋亡相關蛋白BCL-2與BAD的表達情況,以及黑質部DA能神經元的功能情況。
　　 方法:(1)C57BL/6雄性小鼠隨機分為實驗組(MPTP組)和生理鹽水對照組(NS組)兩大組,每大組又分為(給藥前組,給藥后1周,2周,3周,4周,5周)6小組。(2)腹腔注射MPTP,25mg/kg每周2次,連續(xù)五周;NS組每次給予等量生理鹽水。給藥前一周,以及每周第二次給藥后測試

3、行為學變化。(3)采用免疫熒光組織化學,Western blot技術,檢測各時間點BCL-2與BAD蛋白的表達情況。
　　 結果:(1)行為學懸掛實驗,MPTP組隨給藥時間懸掛測試評分逐漸下降,MPTP組第三周給藥以后與NS組比較(P＜0.05);行為學跳臺實驗,小鼠學習記憶能力隨給藥次數及時間的延長逐漸下降(2)BCL-2,BAD蛋白陽性神經元在小鼠黑質致密部存在表達,BCL-2和BAD蛋白在給予MPTP(給藥前,給藥后1周,

4、2周)后變化不明顯,到第3w后BCL-2蛋白含量逐漸下降(P＜0.05),BAD蛋白含量逐漸上升(P＜0.05)。(3)TH與BCL-2和BAD蛋白的相關分析,TH與BCL-2蛋白的表達之間存在顯著正相關關系(r=0.833,P＜0.01),而TH蛋白與BAD蛋白的表達之間存在顯著負相關關系(r=0.883,P＜0.01)。
　　 結論:在小鼠DA能神經細胞慢性損傷過程中,存在BCL-2和BAD蛋白的表達,其表達量和相互關系的變