支氣管肺泡上皮異型增生組織學(xué)類型及其意義.pdf

1、1.研究背景及目的:肺癌是嚴(yán)重危害人類健康的惡性腫瘤之一。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，近幾十年來肺癌的發(fā)病率直線上升，目前在我國的幾個主要城市，男性肺癌發(fā)病率及死亡率均位居首位，女性肺癌的發(fā)病率處于前三位，死亡率位于首位。肺癌起源于支氣管肺泡上皮細(xì)胞，研究表明肺癌在形成前經(jīng)歷了一系列形態(tài)學(xué)及分子水平的改變，從正常的支氣管肺泡上皮細(xì)胞演變成為各種形態(tài)學(xué)表現(xiàn)的肺癌是一個復(fù)雜漫長的多階段多步驟癌變過程。目前較廣泛被接受并被世界衛(wèi)生組織列為肺癌侵襲前

2、病變的有支氣管上皮鱗狀細(xì)胞異型增生，鱗狀細(xì)胞原位癌及肺泡上皮不典型腺瘤性增生。但是，支氣管上皮細(xì)胞起源的肺癌形態(tài)復(fù)雜，病理類型繁多，到目前為止除了對支氣管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過程有深入的研究，并提出了由支氣管上皮化生-鱗狀細(xì)胞異型增生-鱗狀細(xì)胞原位癌，最終發(fā)展為肺的鱗狀細(xì)胞癌這樣一條癌變途徑外，對支氣管粘膜上皮細(xì)胞起源的非鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過程所知甚少，未知其發(fā)生機制，此外，周邊型的肺鱗狀細(xì)胞癌的起源及發(fā)生機制尚未闡明。本研究的目的是通過

3、對手術(shù)切除的肺標(biāo)本進行全面的病理切片、詳細(xì)的形態(tài)學(xué)觀察，免疫組化標(biāo)記(一組細(xì)胞角蛋白抗原，SPA，TTF1，CgA，Syn，p53，Ki-67及bcl-2)，統(tǒng)計學(xué)檢驗，明確支氣管肺泡上皮異型增生類型，分析支氣管上皮異型增生級別及范圍與支氣管肺癌之間的關(guān)系，并初步確定這些支氣管上皮異型增生的“癌前病變”性質(zhì)。 2.材料和方法： 研究材料為2000年2月-2001年11月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院胸外科手術(shù)切除的肺癌標(biāo)本1

4、14個，非腫瘤性肺標(biāo)本18個。對每例肺標(biāo)本從近心支氣管切緣至肉眼可見的末端細(xì)支氣管依次連續(xù)取材(包括被腫瘤破壞的支氣管)，依次編號，常規(guī)病理切片HE染色及光學(xué)顯微鏡觀察。對取自26個肺癌標(biāo)本的具有典型形態(tài)學(xué)表現(xiàn)的53個組織塊的切片(53張切片)進行免疫組織化學(xué)細(xì)胞角蛋白(CK7，8，10/13，17，18)，Syn,CgA,TTF-1，SP-A及p53，Ki-67，Bcl-2標(biāo)記，明確不同類型支氣管上皮異型增生及肺泡上皮不典型腺瘤性增生

5、的免疫組化表達特征，以及初步確定這些支氣管上皮異型增生是否具有癌前病變的性質(zhì)。應(yīng)用McNemar'sTest，TheKappameasureofagreement，theMann-WhitneyU-test(兩獨立樣本)，theKruskal-Wallisone-waynon-parametricANOVA(多獨立樣本)及Spearman秩相關(guān)檢驗，分析支氣管上皮異型增生級別及范圍與支氣管肺癌及多原發(fā)性肺癌之間的關(guān)系，以及肺泡上皮不典型

6、腺瘤性增生與肺泡細(xì)胞癌之間的關(guān)系，p＜0.05(雙側(cè))為有統(tǒng)計學(xué)意義。同時對部分多原發(fā)性肺癌進行微衛(wèi)星標(biāo)記檢測，明確其分子遺傳學(xué)差異及多原發(fā)性起源。 3.結(jié)果 形態(tài)學(xué)上，支氣管上皮異型增生可分為基底細(xì)胞異型增生，柱狀細(xì)胞異型增生，支氣管上皮異型增生伴細(xì)胞分化過渡以及鱗狀細(xì)胞異型增生。肺泡上皮的異型增生有，不典型腺瘤性增生及肺泡上皮鱗狀細(xì)胞異型增生。根據(jù)異型程度及細(xì)胞排列紊亂程度，可將支氣管上皮異型增生分為低級別異型和高級

7、別異型。 免疫組化標(biāo)記顯示，基底細(xì)胞異型增生CK17陽性，部分可局灶性CK10/13陽性，少數(shù)對上述標(biāo)記物均陰性。柱狀細(xì)胞異型增生CK7，8，18陽性，偶然個別細(xì)胞CK10/13陽性，鱗狀上皮異型增生CK10/13陽性，部分病灶CK17局灶性陽性，支氣管上皮異型增生伴細(xì)胞分化過渡細(xì)胞角蛋白表達呈現(xiàn)多樣性和雜合性，即部分病灶僅表達上述某一種細(xì)胞角蛋白；部分病灶內(nèi)的不同細(xì)胞分別同時表達不同的細(xì)胞角蛋白；還有部分病灶對上述各類細(xì)胞角蛋

8、白均陽性。本組53張組織切片的免疫組化標(biāo)記顯示，所有類型的支氣管上皮異型增生Syn，CgA，TTF-1，SP-A標(biāo)記均陰性。肺泡上皮不典型腺瘤性增生TTF-1，SP-A標(biāo)記陽性，CK7，8，18局灶性陽性，CK17，CK10/13陰性。肺泡上皮鱗狀細(xì)胞異型增生CK17，CK10/13陽性，CK7，8，18，Syn,CgA，TTF-1，SP-A均陰性。在被檢測的支氣管上皮異型增生病灶中，69.05％的病灶不同程度p53陽性，92.85％的

9、病灶Ki-67陽性。多數(shù)病灶p53陽性細(xì)胞呈單個散在，而Ki-67陽性細(xì)胞常成片存在。3/3肺泡上皮不典型腺瘤性增生病灶Ki-67陽性，2/3病灶p53陽性。 不同組織學(xué)類型的支氣管上皮異型增生可以出現(xiàn)于同一肺標(biāo)本，同一支氣管，甚至同一張切片中。根據(jù)支氣管上皮異型增生范圍及級別對支氣管上皮異型增生進行綜合評價(反映整個支氣管上皮異型增生程度及范圍)，并根據(jù)綜合評價結(jié)果將本組病例的支氣管上皮異型增生總體程度分為3個等級：0級，1級

10、及2級。綜合等級0級，支氣管上皮基本正常或僅散在小灶性低級別異型增生；1級，支氣管上皮廣泛低級別異型增生(40％以上的受檢切片存在異型增生，在有異型增生的切片中，20％以上的切片異型增生累及的范圍超過支氣管粘膜內(nèi)徑的1/3)但是無高級別異型增生存在，或散在低級別異型增生(指未達到上述“廣泛低級別異型增生”指標(biāo)者)伴有小灶性(偶見，數(shù)個細(xì)胞至十幾個細(xì)胞)高級別異型增生；2級，支氣管上皮存在廣泛的低級別異型增生伴有病灶數(shù)多少不等的高級別異型

11、增生。結(jié)果支氣管上皮異型增生綜合等級0級51例，1級55例，2級26例。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗，支氣管上皮異型增生同時存在支氣管肺癌的比率顯著高于支氣管上皮異型增生同時存在肺泡細(xì)胞癌的比率(p＜0.05)，支氣管上皮異型增生綜合評價等級與支氣管肺癌及多原發(fā)性肺癌發(fā)生比率呈正相關(guān)關(guān)系(p＜0.05)。 肺泡上皮不典型腺瘤性增生出現(xiàn)于26個病例中，病灶數(shù)從1-15個不等。肺泡上皮不典型腺瘤性增生合并肺泡細(xì)胞癌的比率顯著高于肺泡上皮不典型腺瘤性

12、增生合并支氣管肺癌的比率(p＜0.05)。肺泡上皮鱗狀細(xì)胞異型增生出現(xiàn)于3個病例中。 經(jīng)單鏈長度多態(tài)性微衛(wèi)星標(biāo)記分析，3例多原發(fā)性肺癌中，每例的二個原發(fā)性肺癌病灶顯示不同的分子遺傳學(xué)背景。 吸煙者支氣管上皮異型增生范圍及級別(綜合評價等級)顯著高于非吸煙者，隨著年齡的增長，支氣管上皮異型增生的發(fā)生率顯著升高。 4結(jié)論 (1)支氣管上皮細(xì)胞可以同時或先后發(fā)生多種類型的異型增生，并常伴細(xì)胞定向分化的異常，這些

13、不同類型的支氣管上皮異型增生具有不同的細(xì)胞角蛋白表達譜。根據(jù)異型增生細(xì)胞的異型程度及細(xì)胞排列極性紊亂程度，可將支氣管上皮異型增生分為低級別異型和高級別異型。肺泡上皮可以同時發(fā)生多灶性的不典型腺瘤性增生。在這些支氣管肺泡上皮異型增生病灶中可以檢測到頻發(fā)的p53和Ki-67的異常表達，提示這些支氣管上皮的異型增生及肺泡上皮不典型腺瘤性增生可能是癌前病變。 (2)支氣管上皮異型增生有分布特征，如果一個肺標(biāo)本的支氣管上皮存在廣泛的低級別

14、異型增生，往往可見高級別異型增生的存在。如果一個肺標(biāo)本的支氣管上皮基本正常，則難以發(fā)現(xiàn)高級別異型增生。高一級別的支氣管上皮異型增生常出現(xiàn)于一片低級別異型增生病灶中。統(tǒng)計學(xué)檢驗結(jié)果表明支氣管上皮異型增生級別及范圍(綜合評價等級)與支氣管肺癌及多原發(fā)性肺癌密切相關(guān)，肺泡上皮不典型腺瘤性增生與肺泡細(xì)胞癌密切相關(guān)，提示支氣管肺癌可能在廣泛而高級別的支氣管上皮異型增生的基礎(chǔ)上發(fā)生，肺泡細(xì)胞癌可能是肺泡上皮不典型腺瘤性增生進一步發(fā)展的結(jié)果